阮时珍 李月桂 王鹏霖 陈 强 李水添 黄巧珍 江旺坤 黄焕文

(1.福建省宁德市华林微生物技术研究所,宁德 352100;2.广东省梅州市华芝源食用菌推广站,梅州 514788)

我国是世界上第一个成功地大批量人工培养北虫草的国家。自1986年开始,吉林省蚕业科学研究所就探索用柞蚕、桑蚕蛹培育与天然北虫草形态特征相一致的子座,并探索出规模化培育的生产模式。[1]沈阳市农科所等单位于1986—1987年在大米培养基和柞蚕蛹上接种北虫草菌,均获得完整的子座。经检测和临床研究证实,人工培育的北虫草具有和野生虫草相似的化学成分、药理作用及临床疗效,完全可以作野生虫草的替代品,用于医疗及保健等领域。

北虫草传统栽培采用瓶栽,劳动强度大,产量低。近年来,宁德市华林微生物技术研究所与广东省梅州市华芝源食用菌推广站生产基地合作,经多年攻关,业已形成较为成熟的具低成本、高工效、便于推广等特点的盆栽北虫草技术。第一潮转化率平均达55%以上,子实体的形态、色泽接近于天然北虫草产品,品质优良。

1 北虫草的生活条件

1.1 营养 北虫草为兼性腐生菌。营养生理实验表明,以甘露醇为碳源,牛肉膏为氮源时,菌丝生长既快又好。北虫草可用多种昆虫的蛹和幼虫或大米饭培育,在以大米饭为基本成分,添加动物性氮源 (如蚕蛹粉),使之营养更为丰富时,形成子实体快而多。

1.2 温度 北虫草孢子释放适温为22～26℃。菌丝在8～30℃能发育生长,最适温度为18～25℃。8～15℃生长较慢,26～30℃菌丝生长快,但长势弱;30℃以上菌丝生长慢或不能生长。菌核形成的适宜温度10～20℃,子实体形成和生长发育温度为10～25℃,适温为18～23℃。北虫草培育应保持恒温管理,只在原基分化期才给予较大的温差刺激。

1.3 湿度 培养基含水量60%～63%适于菌丝生长。菌丝培养期间,室内相对湿度应保持在65%～68%;子实体生长期间,室内湿度应提高到90%～95%。

1.4 光照 菌丝在黑暗条件下比有散射光时生长旺盛。原基形成和子座生长需要较明亮的散射光,要求保持光照度在100～200勒克斯以上。在完全黑暗的情况下,气生菌丝较旺盛,出现冒菌丝现象;而日夜连续光照则会阻碍子座的分化进程。

1.5 空气 子实体生长期间要保持良好通风,室内二氧化碳浓度含量超过1%,则不能正常分化子座,而往往出现密度很大、子座纤细的畸形子实体。

1.6 酸碱度 菌丝在pH 5～8范围内均能生长,以5.5～6.8为适宜。

2 栽培管理技术

2.1 栽培季节 北虫草从10月至翌年5月均可进行生产,一般可安排2批次生产。由于温度高于30℃时虫草菌丝会出现自溶现象,所以采收期尽量不要安排在6月份以后。

1.从被动到主动，是社区自治的前提。社区居民要有主人翁的意识，通过争当社区精英、热心肠，在做事的过程中带动更多的人参与，形成差序带动格局。在主动服务的过程中形成内生奖惩机制，评选出“热心阿姨”“好大哥”等光辉形象，对那些习惯于搭便车，享受了服务不干事、不配合的家庭或个人要透明、要曝光。

2.2 工艺流程 制备栽培种→配制培养基→灭菌→冷却→接种→上架发菌→出草管理→采收贮存。

2.3 菌种生产 人工栽培北虫草,菌种是关键。为了获得优良菌株,生产者可从食用菌科研机构或有信誉的菌种专业生产厂家购买菌种进行对比,一般说,具有结实性的优良菌株在培养基表面易分泌桔黄色物质,菌丝体在光照的刺激下,也易变成桔黄色或橙黄色,若培养基表面,有紫色或紫红色分泌物,则表明该菌种已严重退化,应弃之不用。生产前需作出草试验,以保证菌种确实可用。

(1)可供选择的母种培养基。①马铃薯200克(煮沸20分钟取汁),葡萄糖20克,琼脂18～20克,磷酸二氢钾2克,硫酸镁3克,蛋白胨5克,水1升。②马铃薯和北虫草培养基各100克 (煮沸20分钟取汁),葡萄糖20克,琼脂18～20克,硫酸镁2克,蛋白胨6克,磷酸二氢钾 3克,水1升。③葡萄糖10克,蛋白胨10克,蚕蛹粉12克,全脂奶粉10克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁2克,维生素B120毫克,琼脂20克,水1升。

(2)母种的生产。采用上述配方配制培养基,装入试管,高压1.5兆帕灭菌30分钟,摆斜面冷却后,在无菌条件下接种。挑选菌丝白色,粗壮浓密,呈匍匐状紧贴培养基生长,边缘整齐,无明显绒毛状白色气生菌丝的优良菌种。接种后的试管置23～25℃恒温箱避光培养。接种后前3天,每天对光检查,弃去污染试管,待菌丝长满斜面后使用。

(3)液体菌种制作。培养基配方:①马铃薯200克,葡萄糖20克,全脂奶粉5克,磷酸二氢钾3克,蛋白胨3克,水1升;②玉米粉30克,葡萄糖20克,蛋白胨1克,酵母粉0.5克,磷酸二氢钾2克,硫酸镁1克,水1升;③葡萄糖10克,蛋白胨5克,蚕蛹粉10克,全脂奶粉10克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁2克,水1升,pH值自然。

将配制好的液体培养液,装入1 000毫升的三角瓶中,装瓶量为500～700毫升,高压1.5兆帕灭菌30分钟,冷却后,在无菌条件下接入3～4片0.5平方厘米大小的母种块,使之浮在液体培养液面上萌发吃料,在22～25℃下,静置培养48小时,观察有无杂菌。挑选无污染的菌种瓶置于每分钟90～120转的电磁摇床上进行培养。在温度23～25℃下培养5～7天,待培养液中出现大量菌丝球且在静置条件下培养液明显分层时即可停止培养。培养好的液体菌种需及时用于生产。

2.4 大米培养基配制 以直径为35厘米,高12厘米的普通塑料盆为例。每盆装入130克大米,蚕蛹粉3.5克,磷酸二氢钾4克,葡萄糖4克,维生素B110毫克,水160毫升。

一般宜用质量低的粳米类作培养基,按配方称量好所有原料,在容器中备好洁净的水。先将磷酸二氢钾、葡萄糖、维生素B1溶于水中,搅拌均匀,使其完全溶解,测量pH值,使溶液pH达到7～8。如过高或过低,可分别用1N(当量)浓度的盐酸和1N(当量)浓度的氢氧化钠调节。每盆先装入大米130克,再加入蚕蛹粉3.5克,然后再加入160毫升的辅料溶液,摇匀后用聚丙稀塑料膜封住盆口,用牛筋绳扎紧,上灶灭菌。采用常压灶进行灭菌,在100℃,维持8～10小时,闷灶4～6小时后,出灶,进冷却室冷却。

2.5 发菌及出草管理 灭菌后,盆料冷却5～8小时至28℃以下后,在无菌条件下,每盆接入液体菌种30～50毫升,用接种器均匀地喷到整个料面。将接种后的盆料排放在发菌出草架上,盆的摆放密度一定要适宜,以利通风透气。发菌阶段温度控制在18～20℃,湿度在60%～65%,黑暗条件下经过9～15天,菌丝即发满全盆,此时可以转入出草管理。

(1)催蕾。在催蕾过程中,需控制好出草室的光照、温度、湿度等。要想使原基分化快速、整齐,首先是要加强光照,光照时间每天保持14～16小时。室内温度一般控制在18～22℃,但须拉大昼夜温差,范围掌握在4～8℃。湿度不可过大,控制在65%～70%,以免气生菌丝徒长而影响分化;另外,还需把封口膜打开一个小口,以保证盆内外空气流动顺畅。管理得当,3～5天后菌丝即可由白色转变为桔黄色,随后在培养料表面逐渐形成桔黄色的菌丝团,再经约7天,菌丝团快速分化,形成大量桔红色小原基。原基分化完成后,催蕾过程即告结束。

(2)子实体生长管理。当原基分化完成后,需将光照时间缩短至每日12小时,料面受光强度需保持均匀,以免子实体在盆内弯卷生长,并适时调整室内空气相对湿度,湿度管理不当易致气生菌丝徒长。初期将湿度控制在80%～85%,待子实体

长度超过周围菌丝表面后,将空气相对湿度增大到90%。同时加强空气流通,逐渐地开大封口膜的通气口。

2.6 采收与加工 当子实体长至5～8厘米长时,子座表面有桔黄色粉状物出现,即表示北虫草已成熟,可以采收。采收时,用带弯头的小铲刀,小心地将子实体从基部铲下。采下的北虫草按标准分级,用干燥设备烘烤,烘干后及时销售,保存。北虫草正品标准,一般是粗细均匀,长度在5厘米以上,颜色桔黄或金黄色,水分低于13%,无边皮碎料。应放在干燥凉爽处避光保存。