包东武，李建华

（南阳医学高等专科学校，河南南阳473000）

厌氧芽胞梭菌标本的制作

包东武，李建华

（南阳医学高等专科学校，河南南阳473000）

厌氧芽胞梭菌；分离培养；实验教学

厌氧芽胞梭菌由于来源困难，临床标本较少，为此，我们从土壤中分离厌氧芽胞梭菌中的破伤风芽胞梭菌、产气荚膜梭菌和肉毒梭菌，制备菌种、芽胞和荚膜标本片，用于临床检验专业的厌氧芽胞梭菌培养实验及其他专业芽胞和荚膜特殊结构形态观察实验，取得了良好的实验教学效果，其分离制备过程如下。

1 材料和方法

1.1 仪器及材料

电热恒温培养箱、电热恒温水浴箱、水浴锅、电炉、庖肉培养基、血平培养基、普通琼脂平板培养基、焦性没食子酸、10%氢氧化钠溶液、纱布、石蜡、无菌毛细滴管、注射器、载玻片、染色液、中性树胶、盖玻片、标本盒、小白鼠等。

1.2 方法

1.2.1 接种标本增菌培养取10支庖肉培养基管放入水浴锅中煮沸20分钟，以除去培养基管内的氧气；把庖肉培养基上层的石蜡在酒精灯上烤化，分别将一豆粒大小的土块（花池中的土块更好）放入培养基管内摇匀；将培养基放入80℃水浴箱内20分钟，以除去土壤中的杂菌；取出培养管并放入37℃培养箱内24～48小时。

1.2.2 分离培养取出庖肉培养基，可见培养管变浑浊，管底肉渣可能部分被消化或变色，产生气体，有腐败恶臭味。选用肉汤轻度浑浊，肉渣部分消化呈微黑色，并产生少量气体，有腐败恶臭味的培养管内的培养物分离破伤风芽胞梭菌；选用肉汤浑浊，肉渣未被消化，但变为粉红色，产生大量气体，将培养管上层的石蜡冲开的培养管内的培养物分离产气荚膜梭菌；……