张艳平 丁矢 向秋玲 李雪兰 欧勇 袁莉

动脉粥样硬化发生的诸多影响因素中，血脂水平代谢异常是造成动脉粥样硬化死亡率及罹患率增加的主要因素[1]。最近发现，人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin 9，PCSK9)是2003年发现的涉及常染色体显性高胆固醇血症的第三个基因[2]，编码前蛋白转化酶NARC-1(neural apoptosis-regulated convertase 1)。pcsk9基因连锁显示其与常染色体显性遗传的高胆固醇血症有关。目前Narc-1/pcsk9作为一个新的治疗靶点已成为高胆固醇血症和动脉粥样硬化研究的热点，对进一步深入探索新的防治途径具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料30只健康纯种雄性新西兰大白兔由湖南省实验动物中心提供;NARC-1免疫印迹试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司;苏木素复染液以及DAB显色试剂盒均购自福州迈新公司。其他试剂为国产分析纯。DMR+Q550型图像分析仪系德国Leic公司产。

1.2 动物模型建立与实验分组选取5月龄健康纯种雄性新西兰大白兔30只，体质量(2.3±0.8)kg。采用单笼喂养，饮水不限。通过适应性喂养1周后随机分为两组:对照组(A组)15只，给予饲喂普通颗粒饲料;高胆固醇组(B组)15只，给予饲喂常规颗粒饲料中添加5%胆固醇、8%猪油、7%蛋黄粉。两组分别喂养12周。

1.3 病理组织学检测喂养12周末，经耳缘静脉注射空气15～20 ml处死动物后，剖开胸腔及腹腔，将心脏至左右髂动脉分叉处的主动脉离断并纵行剖开，生理盐水冲洗血管壁内外残血，4%多聚甲醛固定，进行苏丹Ⅲ染色，取远端1.5 crn处组织放入液氮中保存，用于免疫印迹。免疫印迹分析按照试剂盒的说明进行。……