下呼吸道感染革兰阴性杆菌AmpC酶的检测与耐药性分析
2011-08-13赵永新王伟秦静陈素洁张铁汉
赵永新 王伟 秦静 陈素洁 张铁汉
由于抗菌药物的广泛应用,细菌的耐药性越来越严重,特别是在医院感染中产AmpC酶的革兰阴性杆菌不断增多。为了解我院近年来产AmpC酶革兰阴性杆菌的分布及耐药性情况,我们用改良Hodge试验[1]对我院分离的978株革兰阴性杆菌进行产AmpC酶的检测,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源2008年1月至2010年12月,我院患者经一次性吸痰管从下呼吸道痰标本中分离出的革兰阴性杆菌978株。
1.2 试剂和仪器药敏纸片Oxoid公司;MH琼脂杭州天和微生物试剂公司产品;菌株鉴定试剂珠海迪尔生物工程有限公司。
1.3 方法
1.3.1 产AmpC酶菌株的初筛试验待测菌株用头孢西丁(FOX)检测,以抑菌环≤18 mm作为产AmpC酶的初筛试验。
1.3.2 改良Hodge试验将0.5麦氏单位大肠埃希菌(ATCC 25922)菌液均匀涂布于MH琼脂平板,在平板中央贴一FOX纸片,用接种环挑取2~3个过夜培养的待检菌落,并稍用力沿纸片边缘划向平板边缘,置35℃孵箱培养18 h,观察待检菌周围FOX抑菌圈的变化,如果抑菌圈变化≥2 mm,则提示产AmpC酶阳性。质控菌株:阴沟肠杆菌O29 m作为产AmpC酶的阳性质控菌株,大肠埃希菌ATCC25922作为阴性对照菌。
1.4 药敏试验采用K-B法测定,根据临床实验室标准化委员会CLSI 2009的标准判断药敏结果。质控菌为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。
2 结果
2.1 纸片扩散法初筛试验978株临床分离的革兰阴性杆菌中有456株初筛试验为AmpC酶阳性,阳性率46.63%。
2.2 改良Hodge试验确证试验456株初筛阳性的的细菌中263株阳性,阳性率为57.68%。
2.3 产AmpC酶革兰阴性杆菌的菌群分布从978株革兰阴性杆菌中共检出产酶株263株,阳性率为26.89%。……
