卢东升 王明好 贾 晓

(信阳师范学院，信阳，464000)

野菊［Dendranthema indicum(L.)Des Moul.］为菊科多年生草本植物，其茎、叶、花均可人药，有清热解毒、消炎杀菌、凉血祛肿等功效，能治疗疔疮疖肿、乳腺炎、淋巴结结核、胃肠炎、高血压，亦可防治流感、流行性脑膜炎、肺炎、百日咳等。人们对野菊的药用成分及其功用已进行了系统研究，但关于野菊内生真菌的研究未见报道［1-2］。内生真菌对宿主植物生长、发育、生理代谢均具有重要影响［3］。为了解野菊花内生真菌的种类、分布特点，为内生真菌有益次生代谢物的研究与利用提供依据，笔者于2010年7月至9月在豫南地区选择了5个样地，通过标样采集，内生真菌的分离与鉴定，对此进行了初步研究。

1 材料与方法

培养基：马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，自然 pH值。倒平板时每100 mL培养基中加入5滴无菌的25%乳酸溶液，以抑制细菌生长;促孢培养基：KH2PO41 g，KNO31 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，KC1 0.5 g，淀粉 0.2 g，葡萄糖 0.2 g，蔗糖 0.2 g，琼脂 15 g，水1 000 mL，pH值自然;水琼脂培养基：琼脂20 g，水1 000 mL，pH值自然。

标样采集：在河南省信阳市选取不同生境条件下的野菊样地5个(编号分别为 XX、XJH、XS、XHG、NW)。选健康野菊植株，采集没有腐烂发霉及病斑、病害的健康新鲜嫩枝、老枝、叶片、花蕾等器官适量，分别装入无菌纸塑料袋中，存于4℃冰箱保存备用。

内生真菌的分离与鉴定：叶、花蕾内生真菌的分离同文献［4］，茎内生真菌分离前，先用自来水将表面冲洗干净，晾干水分后切成3 cm长的茎段，分别用75%乙醇、2%次氯酸钠、75%乙醇消毒2、10、1 min，不同消毒剂消毒后均用无菌水冲洗3次，最后将茎段切成0.5 cm短段，老茎纵切成4等份。……