王 东 ， 宋 君 ， 尹 全 ， 陶 李 ， 雷绍荣 ，刘 勇

（1.四川省农业科学院分析测试中心，四川 成都 610066；2.农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心（成都），四川 成都 610066）

0 引 言

随着近年生物技术的迅猛发展，大豆、玉米、棉花、油菜等100多个转基因作物品种已经商业化种植[1]。据不完全统计，由转基因作物加工生产的转基因食品约达4000种[2（]其中豆制品最多），包括部分食用油、酱油、番茄酱、薯条（片）、玉米片、汉堡包等。转基因产品的食用安全问题，虽然一直受到世界各国政府和公众的极大关注[3]，但目前没有科学证据表明食用转基因产品对身体有害。目前很多国家对转基因产品实施标识管理，因此，转基因产品的检测鉴定已成为各主要贸易国的一项重要工作[4]。

在转基因成分检测的DNA分离纯化过程中，三氯甲烷和乙醇往往不能完全除尽而成为后期PCR反应的抑制剂。迄今，关于三氯甲烷和乙醇这2种有机试剂在转基因食品安全检测中的抑制作用未见报道。该文以抗除草剂（CP4-EPSPS）转基因大豆（GTS40-3-2）为研究材料，模拟三氯甲烷和乙醇在反应体系中的残留，探讨这2种有机试剂的残留量对Lectin基因扩增的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

抗除草剂（CP4-EPSPS）转基因大豆GTS-40-3-2，购自欧盟标准物质和计量研究所（institute for reference materials and measurements，IRRM）。

1.2 试验方法

1.2.1 基因组DNA的分离纯化

采用GB/T 19495.3-2004《转基因产品检测核酸提取纯化方法》附录C中CTAB法提取DNA[5]。

1.2.2 Lectin基因扩增

采用GB/T 19495.4-2004《转基因产品检测核酸定性PCR检测方法》的引物和反应条件[6]。扩增转基因大豆内标基因Lectin引物序列，former：5′-GCCCTCTACTCCACCCCCATCC-3′，reverse：5′-GCCCATCTGCAAGCCTTTTTGTG-3′。扩增条件：预变性为95℃ 10 min，1个循环；……