武桂梅,王振辉,张桂荣,刘 军

(1.吉林农业科技学院动物科学学院,吉林吉林132101;2.吉林正业生物制品股份有限公司,吉林 吉林 132101)

目前,用于预防畜禽传染病的疫苗都是没有纯化的。疫苗中含有大量的制苗材料来源的蛋白质及抗生素,无疑是接种动物的各种不良反应的过敏原,严重干扰疫苗蛋白抗原的免疫应答,大大减少中和抗体的产生,导致一些畜禽个体免疫失败[1]。本试验采用膜分离技术对猪瘟病毒的纯化浓缩,显著提高了免疫效果。

1 材料与方法

1.1 微滤/超滤管式陶瓷(有机)膜分离系统(型号:S Y-MU-2-500) 管式陶瓷膜元件孔径0.80μm、0.60 μm、0.45μm、0.22 μm;管式有机膜元件(改良纤维素)5K由本院生物制药实验室提供。

1.2 猪瘟疫苗病毒细胞培养液 吉林正业生物制品股份有限公司提供90000 m L效力检验不合格(病毒最小感染量≥10-4/mL)的猪瘟细胞培养液及合格的常规猪瘟冻干活疫苗(500头份,批号20080109)。

1.3 试剂与实验动物 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产的猪瘟阳性血清(批号20080206)、猪瘟阴性血清(批号20080110)、猪瘟正向间接血凝诊断液(批号20080309)、猪瘟病毒脾淋毒(最小感染量≤10-5/m L)均由吉林正业生物制品股份有限公司提供。仔猪由吉林农业科技学院种猪场提供;健康家兔、小鼠、豚鼠由吉林正业生物制品股份有限公司健康动物舍提供。

1.4 不同膜组合对猪瘟病毒液的纯化与浓缩[2]每组膜纯化浓缩处理30000 mL不合格的猪瘟病毒细胞培养液,分三组进行:1组(0.80μm、5K、0.22 μm)陶瓷(有机)膜过滤器;2组(0.60μm、5K 、0.22 μm)陶瓷(有机)膜过滤器;3组(0.45μm、5K 、0.22 μm)陶瓷(有机)膜过滤器。先分别用0.80μm、0.60μm、0.45μm 陶瓷膜过滤杂蛋白,再用5K有机膜浓缩病毒,最后用0.22μm陶瓷膜除菌处理。……