RP-HPLC法测定北虫草发酵培养物中虫草素的含量
2011-08-07刘静平王永春李勇贾景明宁夏医科大学总医院银川市750004沈阳产品质量监督检验院沈阳市036沈阳药科大学沈阳市006
刘静平,王永春,李勇,贾景明(.宁夏医科大学总医院,银川市750004;.沈阳产品质量监督检验院,沈阳市 036;3.沈阳药科大学,沈阳市 006)
北虫草Cordycepsmilitaris(L.)Link又名蛹虫草,是真菌门子囊菌亚门肉座目麦角菌科虫草属的模式种[1],是我国名贵中药材之一,主要分布于吉林、辽宁、陕西、河北等地[2]。作为我国中药宝库的瑰宝,它具有提高人体免疫力、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等多种医疗和保健作用。
虫草素(3′-脱氧腺苷,3′-Deoxyadenosine)亦称虫草菌素(Cordycepin),是一种核苷类抗生素。虫草素的分子式为C10H13N5O3,相对分子质量为251,熔点为230~231℃,最大吸收波长为259 nm[3]。最初虫草素是从北虫草培养物中分离得到的[4],具有显著的药理活性[5]。笔者改进了虫草素的测定方法,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定北虫草发酵培养物中虫草素的含量,并与野生北虫草做了对比试验。
1 仪器与材料
1.1 仪器
HPLC仪,含LC-10ATvp泵、SPD-10ATvp紫外检测器(日本岛津公司);AT-330柱温箱(天津奥特赛恩斯仪器有限公司);FA2104N电子天平(上海民桥医疗器械有限公司);KH2200B超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司,频率:40 kHz,功率:80W)。
1.2 试药
水为娃哈哈纯净水,甲醇、乙腈为色谱纯;虫草素标准品(美国Sigma公司,含量≥99%)。
1.3 样品
北虫草发酵培养物(韩国东亚大学,批号:DAU-Cm-Kangwon-1);野生北虫草药材由韩国东亚大学提供,由沈阳药科大学贾景明教授鉴定为北虫草C.militaris(L.)Link,标本存放于沈阳药科大学标本馆(标本号:200608210-A)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:DIAMONSIL-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水-甲醇(5∶90∶5);流速:0.8m L·min-1;检测波长:259 nm;柱温:40℃。在此条件下,虫草素的保留时间为14min。色谱见图1。

图1 高效液相色谱图A.虫草素标准品;……
