曾 进，黄 瑾，吕明庄

(1.深圳龙珠医院，广东 深圳518005;2.江西青峰药业有限公司学术部，广东 深圳518034;3.澳门科技大学医院，澳门)

1 材料和方法

1.1 实验动物

青年健康SD雄性大鼠36只，3～4月龄，体重(200±20)g，由贵阳医学院实验动物中心提供［合格证批号为SCXK－(黔)2002－0001］。

1.2 药物及主要试剂

刀豆蛋白A(ConA)和四甲基偶氮唑盐(MTT)均为Sigma公司产品;IL－2和TNF－α放免试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司);兔抗大鼠IL－2和兔抗大鼠TNF－α试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);PV－6001兔二步法检测试剂盒和DAB显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。

1.3 仪器

550 型酶联免疫检测仪(伯乐太平洋有限公司);二氧化碳培养箱(日本)。

1.4 方法

1.4.1 实验动物分组

SD雄性大鼠36只，随机分为正常对照组、CFS模型组、艾灸组，每组12只。

1.4.2 造模方法

适应性喂养7天，采用悬吊冷水游泳复合应激因素复制慢性疲劳动物模型，连续12天［1］。

1.4.3 治疗方法

正常组:不做任何治疗，每天空抓1次，共12天。模型组:不做任何治疗，每天空抓1次，共12天。艾灸组:艾灸穴位肝俞、脾俞、肾俞［2］，隔日1次，每次用艾柱每穴灸1 cm。左右同时灸，灸6次，共12天。

1.4.4 标本采集

治疗结束后，模型组死亡2只，感染2只，死亡原因为游泳溺水。艾灸组感染2只。剩余大鼠用10%水合氯醛麻醉(100 g/0.3 ml)，剪开腹股沟动脉，离心塑料管取血2 ml，台式高速离心机上3 000 r/min离心10 min。吸取血清置于－30℃冰箱保存待测。

1.4.5 指标检测

免疫器官指数:将处死后的各组大鼠分别取出胸腺、脾，去除脂肪、筋膜后称重，计算胸腺指数和脾指数，单位mg/g体重。

脾淋巴细胞的增殖转化能力:采用MTT法检测脾淋巴细胞的增殖情况。……