汤飒爽

(浙江省台州市路桥中医院，浙江 台州 318000)

细胞凋亡研究是近年来生命科学研究的重点之一。X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(X－linked inhibitor of apoptosis，XIAP)属于凋亡抑制蛋白家族IAPs中8个成员中的一员。XIAP是其中抑制凋亡最有力的成员，相对分子质量为57000，基因定位于Xq25，是含有497个氨基酸的蛋白，N－末端含有3个BIR(baculovirus IAP repeat)结构域(BIR1，BIR2，BIR3)。XIAP 通过与 caspase－3，caspase－6，caspase－7直接结合，进一步抑制caspase的激活，从而抑制细胞凋亡;BIR3区可直接与caspase－9前体－C－末端的亚单位结合，抑制caspase－9的激活[1];XIAP还可通过核因子－κB(NF－κB)途径上调 XIAP，c－IAP1，c－IAP2，抑制 caspases的激活，阻断细胞凋亡。另外，许多学者发现，雌、孕激素与其受体的相互作用在妇科恶性肿瘤的发生和发展中起重要作用，并在某种程度上反映患者的预后。米非司酮(mifepristone)系人工合成的类固醇激素，为强效受体水平的孕激素受体拮抗剂、糖皮质激素受体拮抗剂，主要用于终止早期妊娠。近年来，研究发现米非司酮还具有抗肿瘤作用，可用于子宫肌瘤、子宫内膜异位症、妇科恶性肿瘤、脑膜瘤、胶质瘤、前列腺癌等疾病的治疗。宫颈癌是妇女常见恶性肿瘤之一。为了研究XIAP在HeLa细胞中的作用，本研究利用共聚焦荧光显微镜观察细胞内荧光分布情况，用米非司酮诱导凋亡，以流式细胞术检测细胞凋亡状况，初步探讨了XIAP对宫颈癌HeLa细胞的影响及其相互作用。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

宫颈癌细胞系HeLa(购自ATCC)，由遵义医学院中心实验室传代。空质粒pEGFPN1，pDsRed2－N1及其构建的重组质粒pEGFP－XIAP，pDsRed2－XIAP，由遵义医学院病理实验室保存。LipofectionTM2000(Invitrogen公司)。米非司酮购自浙江仙琚制药股份有限公司;AnnexinⅤ－FITC购自晶美公司，流式细胞仪(BDFACBCalibur公司)。……