■文/王 伟

液相色谱是原料乳与乳制品中三聚氰胺检测重要的初筛手段，实际工作中如果检测出来样品中含有高于检出限浓度的三聚氰胺，要用气质和液质进行确认，因为液相法有很多时候检出是假阳性。但作为基层检测机构，液相色谱仍然是经济、实用的方法。GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》规定高效液相色谱法检测原料乳与乳制品中三聚氰胺为第一法。笔者就本实验室的条件对该方法进行了验证实验，并总结了检测中的操作技术要点。

方法原理

1.原理:试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱法测定，外标法定量。

2.试剂与材料:甲醇、乙腈、氨水、三氯乙酸、柠檬酸、庚烷磺酸钠、三聚氰胺标准品、阳离子交换固相萃取柱、定性滤纸、海砂、微孔滤膜、氮气均按GB/T22388-2008规定。

3.仪器和设备:P200Ⅱ型高效液相色谱仪-紫外检测器。离心机、超声波水浴、固相萃取装置、氮气吹干仪、具塞塑料离心管。

4.样品处理:样品用三氯乙酸溶液提取、用阳离子交换固相萃取柱净化、吹氮气保护浓缩、定容。

5.高效液相色谱测定:色谱参考条件:岛津C8柱250n m，用离子对试剂:乙腈(95:5)的流动相条件，岛津C18柱250n m，用离子对试剂:乙腈(90:10)的流动相条件。波长:240nm。柱温:40℃。

技术要点

1.样品提取

1)样品溶解:实验中，固体样品如奶粉加三氯乙酸溶液直接超声，超声后奶粉有时并不能溶解。效果比较好的做法是称取奶粉样品2.0g置于50mL的离心管中，试剂分次加，先加10毫升的三氯乙酸溶液，震荡几下，使之溶解，后用5毫升三氯乙酸溶液和5毫升乙腈冲干净离心管壁，然后摇晃几下，混匀后待超声。……