重组人胰岛素样生长因子-1对db/db小鼠应激性血糖升高的保护作用*
2011-07-21孔繁强周树民赵荣兰梁东春
孔繁强 周树民 赵荣兰 孙 蓓 梁东春
机体在遭受感染、创伤等应激作用时会出现糖代谢改变,若糖的生成率超过清除率则会出现应激性高血糖。持续的高血糖可导致高渗血症、代谢性酸中毒和组织细胞损伤。应激期间血糖控制的好坏是评价糖尿病预后的一个重要指标[1]。对于应激性高血糖,临床上常采用强化胰岛素治疗的方案,效果较好[2]。但对于伴有胰岛素抵抗(insulin resis⁃tance,IR)的糖尿病患者,强化胰岛素治疗却收效甚微。研究表明,胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)-1对糖尿病特别是IR糖尿病患者具有较好的治疗作用[3]。本文旨在研究重组人IGF(rhIGF)-1对2型糖尿病(T2DM)伴IR小鼠应激性血糖升高的治疗作用。
1 材料与方法
1.1 材料 瘦素受体基因缺陷的db/db小鼠(n=30)及同品系的正常小鼠(n=15)均购自南京大学动物中心;rhIGF-1为本实验室自行制备[4];SYBR green Real-time PCR试剂盒和TaqDNA聚合酶为大连宝生物公司产品;兔抗小鼠葡萄糖转运酶(GLUT)4多克隆抗体及HRP标记的上样抗兔IgG购自北京中杉生物技术有限公司;小鼠胰岛素测定试剂盒购自瑞典Mercodia公司;小鼠IGF-1测定试剂盒购自美国Antigenix公司。
1.2 方法
1.2.1 db/db小鼠血糖及血胰岛素水平的监测 自6周龄后,每隔3 d随机抽取db/db小鼠及正常对照小鼠各6只,内眦静脉取血,EDTA抗凝,葡萄糖氧化酶法测定血糖,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆胰岛素及血浆IGF-1水平。当抽检的db/db小鼠表现出明显的高血糖及高胰岛素血症后,测定全部小鼠的血糖、血浆胰岛素及IGF-1水平,筛选出血糖升高显著、胰岛素抵抗明显的db/db小鼠18只用于此后的应激实验。……
