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磺胺二甲嘧啶人工抗原合成及单克隆抗体制备

2011-07-09李君华李春生齐颖颖张小兵闫静辉

湖南农业科学 2011年13期

李君华,吴 萌,李春生,齐颖颖,张小兵,闫静辉

(河北省科学院生物研究所,河北 石家庄 050081)

磺胺类药物(Sulfonamides,SAS)是具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物的总称,在食源性动物的饲养中,被作为兽药广泛应用,在动物疾病防治方面具有显著的疗效[1]。磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine SM2),作为磺胺类药物的一种,具有性质稳定、抑菌谱广、毒性小、口服易吸收、价格低廉等特点,是畜牧业上应用最广泛、应用量最大的药物之一。但它在体内的作用时间和代谢时间较长,易残留在动物体内,并可通过食物等途径在人体中蓄积。药物蓄积浓度超过一定值对人体机能是有害的,长期蓄积则会导致磺胺类药物抗药性的产生,造成耐药菌的流行性感染,且有潜在的致癌性[2]。因此,欧盟对牛奶和肉类食品中的磺胺类药物制定了最高允许值,即磺胺类药物总量不得超过100 μg/kg,单个磺胺类药物的浓度不得超过25 μg/kg[3]。2002年12月我国农业部公告第235号文件规定:在所有食品动物的肌肉、脂肪、肝和肾中,磺胺类药物最高残留限量100 μg/kg,并将磺胺二甲嘧啶列为兽药残留监控的重点[4]。

磺胺二甲嘧啶属于小分子化合物,分子量为278.32,因为小分子本身不具有诱导产生抗体的能力,故必须将小分子与载体蛋白偶联合成出人工完全抗原,才能诱导产生抗体。本文旨在利用重氮化法合成抗原,以此制备出效价高、特异性强的单克隆抗体,为该药物的免疫学检测方法的建立奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

SM2,磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine SMT),纯度99%,Sigma;……

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