郑唐春 王 英 臧丽娜 王亚军 曲冠证 夏德安

(林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)，哈尔滨，150040)(嘉荫县林业局)(林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学))

柽柳(Tamarix hispida)是分布在干旱荒漠区域的一类常见的盐生、旱生和沙生植物，具有良好的防风固沙作用，通过对其进行干旱、盐胁迫处理提取RNA进行RT－PCR分析，然后对获得的柽柳cDNA文库的测序及Blast比较分析，获得了一个具有完整开放读码框的基因序列(GenBank No.EG971462)，因其与拟南芥的命名为 C2H2型锌指蛋白(AT5G16470、AT3G02790、TAIR)的基因具有较高的相似性(氨基酸序列相似性约为80%)，并且通过对SwissProt数据库进行Blast未发现有相似的已知植物蛋白基因，因此可以认为此基因为一个新基因。此基因与来源于哺乳动物的特定锌指基因(ZFP706，Q9Y5V0)具有一定的相似性(氨基酸相似性22%)，因此暂时命名该基因为ThZFL(Tamarix hispida Zinc finger like gene)［1］。

盐碱耐受性的应答机制是受多基因表达互作调控的，例如各种各样的相溶性溶质或渗透剂，多胺类，活性氧分子和抗氧化剂的防卫机制，离子运输和有害离子的区分［2］。多基因间复杂的相互作用导致的高效胁迫应答系统机制尚不清楚，因此寻找相关蛋白之间的联系，绘制蛋白质相互作用图谱就显得格外重要。由Fields和Song［3］发明的酵母双杂交系统，实现了在活体细胞内验证蛋白质间的相互作用。目的蛋白经过在真核细胞中修饰加工后，更能体现其正常的生理活性，对研究此基因的具体生理功能提供实验依据。

本试验以柽柳的cDNA文库为模板，扩增全长的目的片段，构建酵母诱饵表达载体pGBKT7－ThZFL，使其在酵母中稳定表达。……