曲更宝，程 石，宋茂民

(首都医科大学附属北京天坛医院，北京100050)

多西紫杉醇(DTX)是近年研制的杉烷类抗癌药，其单药化疗治疗局部进展期胰腺癌的客观肿瘤反应率为5% ～15%［1］。伊立替康(CPT-11)为特异性拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)抑制剂，研究证实其对多种肿瘤细胞株的抑制率较高，对很多实体肿瘤有肯定疗效［2］。为探讨DTX、CPT-11单用及联用对人胰腺癌细胞株Capan-2的体外抗肿瘤作用，2008～2009年，我们进行了相关研究。现报告如下。

1 材料与方法

1．1 药物及细胞株 DTX(齐鲁制药公司)，CPT-1(江苏恒瑞医药公司)。人胰腺癌细胞株Capan-2由北京天坛医院神经外科研究所提供。细胞株培养在10%小牛血清(杭州四季青公司)、RPMI-1640(美国GIBCO)培养液中，内含0．1%青霉素、链霉素，置于37℃、5%CO2孵育箱内备用。

1．2 方法

1．2．1 MTT法测定 DTX、CPT-1的中效浓度(IC50)将Capan-2细胞制成5×103/ml的细胞悬液，每孔200 μl，加入96孔培养板内。在96孔中分别加入 10－4、10－3、10－2、10－1、1、10、100、1 000 mg/ml浓度的DTX和CPT-1，每孔加20 μl，每个浓度设3个复孔，测量3次取平均值，采用 MTT法、BIO-RAD 550自动酶标读数仪测定DTX、CPT-1的IC50。作用48 h时测得 DTX 的 IC50为 2．27 mg/ml，CPT-1 的IC50为 23．48 mg/ml，DTX、CPT-1 联用的 IC50为12．9 mg/ml。

1．2．2 两药单用及联用时的浓度比例 单用时，DTX 分别设 0．227、2．270、22．700 mg/ml 3 个浓度，CPT-1 分别设23．50、2．35、235 mg/ml 3 个浓度，均作用48 h;每个浓度设3个平行孔，重复3次取平均值，置于37℃、5%CO2孵育箱中培养;用MTT法检测两药单用时的肿瘤抑制情况。联用时，将DTX的3个浓度分别与CPT-1的3个浓度联合，其余方法同两药单用时。

1．2．3 两药联用时的给药时间 给药时间设先用DTX、24 h后用 CPT-1 24 h，先用 CPT-1、24 h 后用DTX 24 h两种，每种设3个平行孔，重复3次取平均值，置于37℃、5%CO2孵育箱中培养。用MTT法检测两药不同时间给药的肿瘤抑制情况。

1．2．4 结果判定 应用联合指数(CI)法测定两药联用时对人胰腺癌细胞株的抑制作用，CI＜1为有协同作用，CI＞1为有拮抗作用，CI=1为有相加作用［3］。……