储益平 居玲玲 高志芬 杨保新

（常州市盛辉药业有限公司，213002）

不同的成型工艺对关节止痛膏中挥发性成分的影响

储益平 居玲玲 高志芬 杨保新

（常州市盛辉药业有限公司，213002）

关节止痛膏；气相色谱

关节止痛膏是由辣椒流浸膏、颠茄流浸膏、薄荷素油、水杨酸甲酯、樟脑、盐酸苯海拉明等成分组成的中西药复方外用橡胶膏剂，对局部血管有扩张作用，具有活血散瘀、温经镇痛的作用，用于寒湿瘀阻经络所致风湿关节痛或关节扭伤，收载于2010年版《中国药典》中药成方制剂中。樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯等成分不仅能够促进有效成分的渗透吸收，而且自身也有一定的活血镇痛作用，对于提高橡胶膏剂的贴敷舒适性也有不错的效果。本公司采用气相色谱法，测定其中樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的含量，该法灵敏度高，专属性好，操作简便，重复性好，结果理想，可作为本品的质量控制方法，探讨了不同成型工艺对橡胶膏剂中挥发性成分的保留情况。

1 仪器与试药

FA2004十万分之一电子天平（梅特勒公司）；Agilent6820气相色谱仪（美国安捷伦公司）；FID检测器。薄荷脑对照品（批号：110728-200506），水杨酸甲酯对照品（批号：110707-200710），樟脑对照品（批号：110747-201008），萘（批号：110673-200803），均购于中国药品生物制品检定所；乙酸乙酯（南京化学试剂有限公司），分析纯。关节止痛膏样品、阴性样品由本公司自制。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备 1）对照品储备液的制备：称取樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯适量，精密称定。分别加乙酸乙酯制成每1mL各含18.05mg、2.06mg、9.704mg的混合溶液，即得。2）内标溶液的配制：精密称取萘适量，加乙酸乙酯溶解配制成每1mL含11.10mg萘的溶液。3）供试品溶液的制备：取橡胶膏1片，除去盖衬，称重后剪成适当尺寸的块状，置于250mL圆底烧瓶中，加水100mL，照挥发油测定法甲法，自测定器上端加水至充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，再加甲苯2mL，加热回流提取3h，放冷，取甲苯液，加乙酸乙酯3mL稀释，置铺有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液置50mL量瓶中，以适量乙酸乙酯分次洗涤容器及滤器，洗涤液并入同一量瓶中，精密加入内标溶液5mL，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即制得供试品溶液。

2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱条件［1］：以聚乙二醇20000（PEG-20M）为固定相（0.32mm× 30m×0.25μm）的毛细管柱；进样口温度：200℃；分流比为10：1；柱温为140℃，载气为氮气，检测器温度：250℃。

照上述色谱条件测定，比较了樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯对照品溶液及供试品溶液及缺樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的阴性样品液的色谱图。结果表明，在此色谱条件下，樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的色谱峰与其他组分色谱峰均能达到基线分离，阴性样品中色谱峰对测定无干扰，且在未加内标的样品色谱中，在内标相应位置未见色谱峰。

2.3 校正因子测定 分别精密吸取樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯对照品储备液制成适当浓度溶液，加入内标溶液1μL，注入气相色谱仪中，计算樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯校正因子。

2.4 线性关系的考察 精密吸取对照品储备液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，置10mL量瓶中，分别精密加入萘内标溶液（11.10mg/mL）1mL，加入乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。分别取1μL注入气相色谱仪中，以对照品浓度为横坐标（X），对照品峰面积与内标峰面积比为纵坐标（Y），绘制标准曲线，计算得樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的回归方程，分别为：Y=0.7401X+ 0.0107，r=0.9999（n=5）；Y=0.6354X+0.0011，r= 0.9999（n=5）；Y=0.3072X+0.0024，r=0.9999（n= 5）。结果见表1-3，图1-3。由表1可见樟脑在0.903～4.513mg/mL范围内有良好的线性关系。由表2可见薄荷脑在0.103～0.515mg/mL范围内有良好的线性关系。由表3可见薄荷脑在0.485～2.426mg/mL范围内有良好的线性关系。

2.5 精密度试验 取对照品溶液，按上述色谱条件，连续进样6次，进行测定，分别计算樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯与内标峰面积的比值，RSD（n=6）分别为1.71%、1.47%和1.66%。结果表明仪器精密度良好。

图1 樟脑的标准曲线（n=5）

图2 薄荷脑的标准曲线（n=5）

图3 水杨酸甲酯的标准曲线（n=5）

表1 樟脑的标准曲线（n=5）

表2 薄荷脑的标准曲线（n=5）

表3 水杨酸甲酯的标准曲线（n=5）

表4 樟脑的精密度结果（n=6）

表5 薄荷脑的精密度结果（n=6）

表6 水杨酸甲酯的精密度结果（n=6）

2.6 稳定性试验 取同一样品的供试品溶液，精密吸取1μL，每间隔一定时间（0、2、4、8、12、24h）进行测定，分别计算樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的含量，RSD（n= 6）分别为0.86%、1.61%和2.50%。结果表明供试品溶液在24h内基本稳定。

表7 樟脑的稳定性结果（n=6）

表8 薄荷脑的稳定性结果（n=6）

表9 水杨酸甲酯的稳定性结果（n=6）

2.7 重复性试验 取同一样品5份，按上述色谱条件进行测定，结果显示樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的含量（n=5）RSD分别为1.19%、2.06%和1.41%。

表10 樟脑的重复性结果（n=5）

表11 薄荷脑的重复性结果（n=5）

表12 水杨酸甲酯的重复性结果（n=5）

表13 樟脑加样回收率试验结果（n=6）

2.8 加样回收率试验 称取6份已知含量的同一批样品各1片，精密称定，分别精密加入对照品溶液适量，按供试品溶液的制备方法制备供试液，照上述色谱条件，测定含量，计算回收率。结果显示樟脑平均回收率为100.17%，RSD为1.64%；薄荷脑平均回收率为98.25%，RSD为2.04%；水杨酸甲酯平均回收率为99.90%，RSD为2.04%。表明本方法具有良好的回收率。

表14 薄荷脑加样回收率试验结果（n=6）

表15 水杨酸甲酯加样回收率试验结果（n=6）

2.9 样品测定 取不同工艺关节止痛膏，按供试品溶液的制备方法进行处理。吸取供试品溶液1μL，注入气相色谱仪中，采用内标法加校正因子测定樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯的含量。样品含量以mg/cm2为单位，结果见表16。

表16 样品测定结果（mg/cm2）

表17 挥发性成分的保留率

3 讨论

3.1 中药橡胶膏剂成型工艺一般分为溶剂法和热压法2种。而以溶剂法为多见，传统工艺在经过溶胶、搅拌后涂布于盖衬材料上，经蒸汽隧道烘箱高温烘干，隧道长度和烘干时间均很长，收卷后与背衬材料复合，再分条分切包装；而现代工艺在经过溶胶、搅拌后涂布于背衬材料上，经较低温度快速吹干，而后卷切一次完成；从安全、能耗、效率和效果上具有明显优势。

3.2 由表16、17可知不同生产工艺的关节止痛膏中樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的含量差异较大，经分析原因，各成分的含量差异确实与制备工艺有关。目前国内药厂中药橡胶膏的生产工艺仍普遍采用溶剂法，在橡胶膏的生产过程中，使用蒸汽烘干，烘干温度较高（80℃），时间较长，挥发性成分易在加热挥去汽油等溶剂的环节中随汽油挥发而大大损失。但也有厂家通过优化橡胶膏剂的成型工艺技术烘干温度控制在40℃左右，时间短，从而大幅度减少了易挥发性成分损失。通过保留大量挥发性成分，不仅能加快有效成分的渗透吸收，发挥活血镇痛作用，而且对提高橡胶膏剂的贴敷舒适性也有很好的效果。随着筛选新的辅料，优化基质处方，选用新型溶剂和工艺，一定会对中药橡胶膏剂这一传统剂型发挥新的作用，并使之更易于被患者接受。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.一部，北京：化学工业出版社，2010：705.

（2011 -02 -21 收稿）

“十一五”国家科技支撑计划项目（2008BA153B071）