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管碟法测定抗生素效价的影响因素及控制方法

2011-05-29蒋惠岚

中国兽药杂志 2011年8期
关键词:测量

蒋惠岚

(广西壮族自治区兽药监察所,南宁 530001)

管碟法是国内外常用的抗生素微生物检定法[1]。其原理是根据抗生素在一定浓度范围内,对数剂量与抑菌圈直经(面积)呈线性关系,比较标准品(S)与供试品(T)两者对接种的特定试验菌的固体培养基内呈球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区,抑制了试验菌的繁殖而呈现透明的抑菌圈大小,计算出供试品的效价[2]。因为试验过程中影响结果的因素较多,任何一个环节操作不当或疏忽就会造成很大误差,甚至导致整组实验的失败。笔者根据多年的工作实践,对以下关键的影响因素进行了试验研究,并提出控制方法,供同行参考。

1 实验器材的影响

1.1 实验环境的选择 操作室要洁净,室内设有紫外灯,定期消毒,无抗生素的污染。操作台面要求水平平整,最好用大理石台面[2]。

1.2 实验器材的选择 双碟要求[2-4]碟底水平,无气泡。钢管要求[2],内外壁及两端面光洁平坦,管壁厚薄一致,重量相等。钢管二端面不够平整可使抗生素溶液漏出,破坏均匀扩散现象。钢管重量相同,能保证均匀扩散。移液管、容量瓶必须经过检定。

1.3 实验器材的清洗 玻璃双碟和钢管要特别注意清洁,如果因为清洗不干净而残留有抗生素或清洁液等污染,在下次实验中造成抑菌圈不正常现象。玻璃双碟和钢管先灭菌再清洗,玻璃双碟等其他玻璃容器最好用重铬酸钾硫酸洗液浸泡。钢管最好定期加洗衣粉置超声波清洗,再用流水多次冲洗干净,最后用纯化水冲洗3次。……

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