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人参皂苷Rg3对兔耳增生性瘢痕中Caspase-3、细胞色素C表达的影响

2011-05-29刘鹤松赵自然吉林大学第一医院皮肤性病科吉林长春130021

中国老年学杂志 2011年16期

刘鹤松 王 芳 吴 杰 赵自然 (吉林大学第一医院皮肤性病科,吉林 长春 130021)

病理性瘢痕(Pathological Scar,PS)是整形外科研究的重点及难点,随着对其发生、发展机制的深入研究,发现细胞凋亡在病理性瘢痕形成中起着重要的作用。人参皂苷Rg3(GSRg3)是从人参中分离提纯的一种单体,为四环三萜类人参二醇型皂苷〔1〕。目前国内外关于GS-Rg3的研究主要是针对肿瘤的治疗,大量研究表明GS-Rg3能促进肿瘤细胞凋亡,并抑制其转移。最近研究发现Caspase-3、细胞色素C对细胞凋亡的形成起重要作用,与瘢痕增生密切相关〔2,3〕。本实验通过建立兔耳增生性瘢痕模型,研究GS-Rg3对兔耳增生性瘢痕Caspase-3、细胞色素C的影响。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 大耳白兔24只,雌雄不拘,体重(2.5±0.2)kg,吉林大学实验动物中心提供。根据时间分为2 w、4 w、6 w实验组三组及对照组。

1.2 主要仪器及试剂 主要仪器:高精度轮转式石蜡切片机,购自日本的LAICA。电热恒温干燥箱购自中国上海实验仪器总厂。石蜡包埋机、恒温孵化箱购自日本的SANYO。显微镜购自日本的OLYMPUS。CO2孵箱购自美国SHEL LAB;酶标仪购自美国BIO-RAD。免疫组化试剂盒、DAB显示试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。主要试剂:GS-Rg3来自吉林大学基础医学院。柠檬酸盐缓冲液(0.01 mol/L,pH6.0)、0.01 mol/L(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)为吉林大学白求恩医学院配制。

1.3 方法

1.3.1 动物模型的制备 用速眠新注射液0.2~0.3 ml/kg肌肉注射。麻醉生效后,消毒兔耳腹面皮肤,切除2 cm×2 cm的全层皮肤,每耳4~6处。将动物编号,分笼饲养。3 w后创面形成凸起的增生性瘢痕组织。于四组动物耳部增生性瘢痕组织处行局部封闭注射,实验组注射GS-Rg3(浓度6 mg/2 ml),对照组注射等体积的0.9%生理盐水,三天一次。……

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