史惠蓉 吴开元 张海玲 刘惠娜

郑州大学第一附属医院妇产科，河南 郑州 450052

DLC1基因对人卵巢癌细胞OVCAR-3顺铂耐药性的影响

史惠蓉 吴开元 张海玲 刘惠娜

郑州大学第一附属医院妇产科，河南 郑州 450052

背景与目的：有研究发现，肝癌缺失基因1(DLC1)在多种肿瘤中低表达或不表达，其通过调节黏着斑激酶(FAK)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)等影响肿瘤细胞的凋亡。而对于DLC1在卵巢癌中的表达及作用等的研究甚少，本实验采用DLC1基因转染该基因表达缺失的人卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3，观察转染前后该细胞对顺铂耐药性及FAK、p38MAPK的变化。方法：将OVCAR-3细胞分为3组，空白组为未经处理的OVCAR-3细胞，阴性对照组转染空质粒pEGFP-C3，实验组转染重组质粒pEGFP-C3-DLC1。RT-PCR和Western blot检测各组细胞中DLC1基因和蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)，Western blot观察FAK、p38蛋白及其磷酸化水平的变化，流式细胞仪测定顺铂处理前后各组细胞凋亡率及周期分布改变。结果：DLC1基因和蛋白在实验组表达而空白对照组和阴性对照组均未见表达，实验组细胞与其他两组细胞相比，对顺铂的IC50较低(4.02vs4.99/4.90 μmol/L，P＜0.01)，p-p38蛋白表达上升而p-FAK蛋白表达下降(3.02vs1.52/1.61，3.13vs9.03/8.99，P＜0.01)，顺铂处理前后实验组与其他两组细胞相比凋亡率增加(8.97%vs1.81%/1.95%，30.68%vs18.03%/20.33%，P＜0.01)，G1期细胞比例增加(65.80%vs60.82%/59.80%，66.48%vs55.42%/53.94%，P＜0.05)。结论：转染DLC1基因可使OVCAR-3G1期细胞比例及凋亡率升高，对顺铂敏感性增加，该作用可能依赖于细胞内外源性DLC1基因的表达、p-FAK表达降低和p-p38表达增强。

DLC1基因； 卵巢癌； 逆转耐药； 凋亡； 细胞周期

卵巢癌治疗过程中易出现耐药和复发，其耐药性产生的原因之一是肿瘤细胞凋亡途径如PI3K/AKT、MAPK和Jak/STAT等信号通路的异常，黏着斑激酶(FAK)是这些信号通路的交汇点［1-2］。……