王海彬，王东华，张铁民（承德医学院附属医院眼科，承德市 067000）

糖尿病视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）是糖尿病微血管病变在眼部的重要并发症[1]。从中医学角度讲，其发病辨证为阴虚为本、血瘀为标，治以益气养阴、活血化瘀类中药，临床上可取得较好效果。本课题组利用糖尿病模型大鼠的视网膜石蜡切片进行免疫组化研究，观察了血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白在不同组别的表达情况，旨在研究菩人丹超微粉在早期DR治疗中的作用。

1 仪器与材料

1.1 仪器

E600型光学显微镜（日本尼康公司）；ONE TOUCH血糖仪（强生（中国）有限公司）。

1.2 试药

人参、丹参、制何首乌、葛根、水蛭均由河北省承德医学院附属医院中药房提供，由河北省承德医学院附属医院王东华主任药师鉴定为真品；链脲佐菌素（STZ，美国Sigma公司）；苦瓜由笔者购买。

1.3 动物

健康Wistar大鼠60只，♂，体重150～200 g，由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供（动物生产许可证号：SCXK（津）2005-0001）。

2 方法

2.1 复制模型

将STZ溶于0.05 mol·L-1柠檬酸缓冲液（pH 4.5），制备成浓度为1.25%的溶液，随机选取50只大鼠，ip STZ 60 mg·kg-1以诱发糖尿病，另外10只作为正常组，仅ip同样体积的柠檬酸缓冲液，注射3 d后用血糖仪测血糖，用尿糖试纸测尿糖浓度，以血糖＞16.5 mmol·L-1、尿糖（++++）、尿量以及饮水明显增多者作为实验对象。

2.2 菩人丹超微粉的组方和制备工艺

2.2.1 组方 苦瓜原汁10 kg，人参1 kg，丹参3 kg，制何首乌1 kg，葛根1 kg，水蛭0.3 kg。

2.2.2 制备工艺 苦瓜原汁10 kg，过滤，减压浓缩到0.6 kg；人参、丹参，粗碎成5 mm左右颗粒，加10倍水回流提取3次，时间为2、1.5、1 h，浓缩；葛根、制首乌加10倍量70%乙醇回流提取2次，时间为1.5、1 h，浓缩；水蛭加10倍量90%乙醇回流提取2次，时间为2、1.5 h（提取温度控制在60℃），浓缩。……