祛瘀化痰、散结消癥中药复方对细胞外基质降解调控系统及TGF-β1mRNA的影响Δ
2011-05-23冯天保广州中医药大学广州市510006
倪 晨,王 倩,冯天保(广州中医药大学,广州市 510006)
肾小球硬化(Glomerular scerosis,GS)是肾小球疾病发展至终末期,肾功能衰竭的主要病理改变。其中细胞外基质(ECM)降解减少、过度积聚,是GS的重要发病机制[1,2]。在ECM降解调控系统中发挥重要作用的是基质金属蛋白酶(MMP)和基质金属蛋白酶抑制物(TIMP)系统[3](MMPs-TIMPs),随着TIMP-1表达增强,MMP-9降解作用减弱,MMP-9与TIMP-1的比值失调,最终形成肾小球硬化。此外,细胞因子在GS的形成过程中也起着非常关键的作用,其中转化生长因子[4](TGF)-β1的调控作用尤为重要。TGF-β1既能促进ECM合成增加,同时又抑制ECM的降解,最终导致ECM聚积,形成肾小球硬化。本研究针对上述病理机制,选取川芎、鳖甲、海藻[5~7],配伍组成川芎、川芎+鳖甲、川芎+海藻、川芎+鳖甲+海藻组,分别体现活血祛瘀法,活血祛瘀、散结消癥法,活血祛瘀、化痰散结法,活血祛瘀、化痰、散结消癥法等四则治法,考察祛瘀化痰、散结消癥中药复方对ECM降解调控系统及TGF-β1mRNA的影响。
1 仪器与材料
1.1 仪器
超净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司);CO2恒温培养箱(美国Harris公司);TE2000型倒置显微镜(日本Nikon公司);3000型酶联免疫检测仪(美国BioRad公司);FA2204B型电子精密天平(上海精密科学仪器有限公司);7300型荧光定量PCR仪(美国ABI公司);5810(R)型冷冻离心机(德国Effendorf公司)。
1.2 试药
川芎、鳖甲、海藻均购自康美药业股份有限公司,经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定为真品;福辛普利钠片(蒙诺,中美上海施贵宝制药有限公司,批号:H20090197),粉碎后用蒸馏水配制成0.33 g·mL-1的溶液;脂多糖(LPS)、MTT(美国Sigma公司);胎牛血清(FCS)、RPMI 1640培养干粉(美国Gibco公司);……
