谢健，闵苏（1.重庆市急救医疗中心麻醉科，重庆市 400030；2.重庆医科大学附属第一医院麻醉科，重庆市 400016）

参附注射液（Shenfu injection，SFI）主要含人参皂苷和乌头碱。近年来，大量临床研究将SFI用于器官、组织缺血再灌注时保护性治疗，以达到减轻缺血再灌注损伤的目的，并取得了良好效果[1～4]。本研究拟探讨SFI对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障和皮质神经元病理学有无影响。

1 仪器与材料

1.1 仪器

721型分光光度仪（上海济成分析仪器厂）；水浴箱（上海人和科学仪器有限公司）；TGL-16A型离心机（上海精密仪器仪表公司）；EM FC7型超薄切片机（德国 Leica公司）；Hitachi-7500型透射电子显微镜（日本日立公司）。

1.2 试药

SFI（雅安三九药业有限公司，批号:071108）；水合氯醛（青岛汇和化工有限公司，批号:070621）；伊文思蓝（EB，美国进口分装，上海如吉生物科技发展有限公司）。

1.3 动物

清洁级健康SD大鼠80只，♂，体重200～270 g，由重庆医科大学实验动物中心提供（动物生产许可证号:SCXK（渝）200220001）。

2 方法

2.1 复制模型、分组和给药

实验分为4组，即空白对照、假手术、模型和SFI组。麻醉前禁食6 h，采用Zea Longa线栓法[5]制备大鼠右侧大脑中动脉（middle cerebral artery，MCA）缺血2 h再灌注24h模型。iv给药。

2.2 指标的测定

2.2.1 血脑屏障病理改变的观察 于缺血2 h再灌注24h即刻麻醉后开胸，主动脉插管，生理盐水冲洗血液，待右心房切口流出液无色透明时用2.5%戊二醛固定液进行灌注固定。灌注结束后开颅取脑，取右侧顶叶皮质，用双面刀片修块成1mm3大小，浸入上述固定液中继续固定2 h以上。之后用1%锇酸固定，梯度酒精脱水，Epon812环氧树脂包埋，切片机制成超薄切片，铀铅染色，透射电镜观察血脑屏障的病理改变（脑毛细血管周围水肿情况和毛细血管管腔受压迫情况）和大脑皮质神经元的病理改变。……