杨耀兰,薛 涛,吕素珍,梁中枢,赵明丽,刘保有

(1.玉溪市动物疫病预防控制中心,云南 玉溪 653100; 2.玉溪市动物卫生监督所,云南 玉溪 653100;3.峨山县动物疫病预防控制中心,云南 峨山 653200; 4.江川县动物疫病预防控制中心,云南 江川 652600)

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是迄今发现的一种最小的动物病毒,现已知 PCV有 PCV-1和 PCV-2两个血清型,PCV-1为非致病性的病毒,PCV-2为致病性的病毒,是断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Synd rome,PMWS)的主要病原。本病于 1991年首先在加拿大被发现,1996年暴发于世界许多国家。我国 2002年证实猪群中存在本病,临床上主要表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征和新生仔猪先天性震颤,母猪繁殖障碍等,并出现严重的免疫抑制,从而容易导致继发或并发其他传染病,被世界各国公认为最重要的猪传染病之一。近年来,随着玉溪市养猪业的发展,生猪及其产品大流通,种猪的大量引进等原因,PCV-2引起的猪圆环病毒病不断发生,其流行情况也呈上升趋势。为了解玉溪市猪群中PCV-2的感染、分布及流行情况,有效预防、控制猪圆环病毒病,减少该病给玉溪市养猪业带来的经济损失。笔者应用ELISA方法,自 2004～2009年期间,对玉溪市猪PCV-2感染情况进行血清学调查。

1 材料与方法

1.1 猪血清样品

自 2004～2009年期间采自玉溪市 9个县区,样品总数为 2 478份,其中采集了 170个规模化养猪场(存栏 100头以上)未免疫血清 1 606份,散养户(饲养 10头以下)309户的未免疫血清 872份。血清于 -18°C保存备用。

1.2 诊断试剂

猪圆环病毒 2型抗体 ELISA检测试剂盒,由武汉科前动物生物制品有限责任公司提供。

1.3 检测仪器

Biocell2010酶标仪由郑州博赛生物工程有限责任公司提供,单道可调微量加样器,多道可调微量加样器等。

1.4 检测方法

①洗涤液配制:试剂盒使用前各种试剂平衡至室温(25℃左右),用去离子水将洗涤液作 20倍稀释备用。②样品稀释:在血清板中按 1∶40的体积稀释待检血清;阳性和阴性对照按 1∶4稀释备用。③取检测板用稀释好的洗涤液洗板 2次,每次静置 2m in后倒掉,再在干净的吸水纸上拍干。④取稀释好的血清样品 10μL加入到检测板中;阴性对照和阳性对照各设 2孔,每孔 100μL;轻轻振匀孔中样品,置 37℃温育 30min。⑤甩掉板中的溶液,用洗涤液洗板 3次,200μL/孔,每次静置 3min,倒掉,再在干净的吸水纸上拍干。⑥每孔加酶标二抗 100μL(抗猪IgG-HRP结合物),置37°C温育 30min。⑦洗涤 5次,方法同⑤。⑧每孔先加底物液 A 1滴(50μL),再加底物液 B 1滴(50μL),混匀,室温避光显色 10m in。⑨每孔加终止液 1滴(50μL),10min内在酶标仪上测定结果。

1.5 结果判定

在酶标仪上测各孔OD 630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均 OD 630值大于或等于 1.0,阴性对照孔平均OD 630值必须小于 0.3。样品 OD630值大于 0.42,判为阳性;样品 OD630值在 0.38到 0.42之间,判为可疑;样品OD 630值小于 0.38,判为阴性。

2 结果

2.1 玉溪市 2004～2009年抽检的 2 478份血清样品 PCR-2抗体检测结果

阳性率从 2004年的 5.03%逐年上升到 2009年的31.23%,并且呈逐年上升的趋势(见表 1)。

表 1 玉溪市PCV-2各年度血清学检测结果

2.2 不同养殖方式猪群的圆环病毒 2型抗体检测结果(见表2)

(1)同一年度不同饲养方式阳性率情况:由表 2的结果经 t检验得出,2004年和 2005年的散养户与规模场阳性率差异不显著(P＞0.05);2006年、2007年、2008年散养户与规模场阳性率差异极显著(P＜0.01);2009年散养户与规模场阳性率差异显著(P＜0.05)。

(2)不同的饲养方式猪PCV-2阳性率差异性很大。规模场阳性率 6年总平均值为 26.90%,散养户阳性率 6年总平均值为 8.14%,相差 18.76个百分点。规模猪场阳性率较高,其中 2006～2009年阳性率在 25%～50%。散养户阳性率在 4%～10%,到 2009年有较大增加,达 19%。

2.3 种猪与育肥猪圆环病毒病 2型检测结果(见表 3)

表 3 种猪与育肥猪PCV-2感染情况检测结果

由表 3结果经 t检验得出,同年度比较 2004年种猪与育肥猪阳性率差异不显著(P＞0.05),2005年、2006年、2007年、2008年、2009年种猪与育肥猪阳性率差异极显著(P＜0.01);6年合计比较:种猪阳性率 6年总平均值为 37.19%,育肥猪阳性率 6年总平均值为 7.63%,相差 29.56个百分点,阳性率差异极显著(P＜0.01)。不同年度之间比较,种猪和育肥猪阳性率都呈逐年上升趋势。

3 分析与讨论

(1)通过玉溪市 2004～2009年对猪圆环病毒病 2型感染情况的调查结果表明,玉溪市 9县(区)都存在 PCV-2感染,表明猪圆环病毒病在玉溪市已广泛存在。感染率从 2004年到 2009年呈逐年上升的趋势。

(2)从不同饲养方式的猪PCV-2感染检测情况来看,规模化养猪场的猪群感染率明显高于散养户,并且差异显著。规模养猪场和散养户分年度的感染率都呈逐年上升的趋势。随着生猪交易频繁,农村散养户存在暴发流行该病的隐患。不同规模猪场阳性率在 10%～70%不等,这可能与各猪场的饲养管理、其它疫病预防等有关。

(3)种猪的感染率明显高于育肥猪,这可能与近几年大量引入种猪,又不进行检疫、净化有关。另外,不同品种、不同日龄的猪群均有感染。

4 防治

猪圆环病毒病目前无特效的治疗方法,除加强饲养管理,提高营养水平,注意环境卫生及消毒等综合防治措施外,笔者就该病的防治,提出以下几点建议:

(1)清除带毒猪,净化猪场。一旦发现可疑病猪,应立即隔离,加强消毒,切断传播途径,杜绝疫情传播。

(2)把好引种关,做好引入种猪的检疫和隔离消毒工作,隔离、淘汰阳性种猪。

(3)猪圆环病毒病易与其它病原混合感染或继发多种细菌感染,所以要做好相关疫病的疫苗接种,减少混合感染。加强饲养管理,控制继发感染,提高猪群的免疫能力,做到早预防、早发现、早治疗。

(4)药物防治:该病重在预防,应在未发病之前使用药物进行预防。当猪群发病时,治疗效果一般不理想,可根据发病猪混合感染的具体情况,选用阿莫西林、氟苯尼考等抗菌素配合使用清热解毒类中药制剂及有免疫增强作用的黄芪多糖等药,进行肌肉注射,连续治疗 5～7 d,同时在饮水或饲料中投入免疫增强剂(黄芪多糖)、复合电解多维、葡萄糖等进行饮水 1周,达到控制继发感染,降低应激反应,提高猪体抵抗能力,降低发病死亡比例的目的。