柳新红，李 楠，李因刚，徐 梁，盛炜彤，惠刚盈，郑勇奇

（1. 中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091；2. 浙江省林业科学研究院，浙江 杭州 310023）

白花树SRAP—PCR反应体系的建立与优化

柳新红1,2，李 楠2，李因刚2，徐 梁2，盛炜彤1，惠刚盈1，郑勇奇1

（1. 中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091；2. 浙江省林业科学研究院，浙江 杭州 310023）

以白花树叶片的总DNA为模板，通过正交试验设计，确定了适合白花树的SRAP-PCR的20 µL最佳反应体系为：24 ng模板DNA，2.0 mM的Mg2+，0.5 mM的dNTPs，1.25uM的引物，1.5 U的Taq DNA聚合酶，2 µL的10× PCR缓冲液。经琼脂糖凝胶电泳检测，特征性条带清晰，信息量大，稳定。

白花树；SRAP-PCR；反应体系；正交设计

白花树（Styrax tonkinensis）又名越南安息香、滇桂野茉莉、白背安息香，属安息香科安息香属落叶乔木，是热带和亚热带树种，分布于我国的云南、广东、广西、贵州、福建、湖南、江西、重庆等省（市、区）以及越南、老挝等国[1]。该树种生长迅速，成材期短，萌芽力强[2]，是制浆、造纸等短周期工业原料林的首选树种之一；同时该树种结果量大，早实丰产，种子含油率高，也是材、油兼用的优良生物质能源树种。此外，白花树树脂“安息香”，含较多香脂酸，是贵重药材[3]，有防腐、消炎、祛痰、行气血之效，并可制造高级香料。

相关序列扩增多态性（Sequence-related amplified polymorphism，SRAP）标记是基于聚合酶链式反应（PCR）的新型分子标记技术[4]。该标记根据基因外显子中GC含量丰富的内含子、启动子中AT含量丰富的特点，设计一对适宜引物进行PCR扩增，因不同个体的内含子、启动子与间隔区的长度差异而产生多态性。SRAP标记与RFLP（Restriction Fragment Length Polymorphism）、RAPD（Random Amplified Polymorphic DNA）、ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat）、AFLP（Amplified Fragment Length Polymorphism）、SSR（Simple Sequence Repeat）等分子标记技术相比，具有技术简……