邱小华,刘 伟

人乳头瘤病毒 (human papillomavirus,HPV)是一种嗜上皮性病毒,在人和动物中分布广泛,有高度的特异性。HPV感染与宫颈癌的关系最初在19世纪 70年代提出,此后许多流行病学和分子生物学研究均毫无疑问地证实了 HPV与宫颈癌的病因学联系。但宫颈癌与 HPV基因型分布的地区差异性的关系尚待进一步探讨。本研究应用基因芯片方法对 125例宫颈癌患者宫颈脱落细胞进行了 23种 HPV基因分型检测,并探讨HPV基因型与宫颈癌类型的关系,以进一步了解宫颈癌患者中 HPV感染的基因分布情况与地区关系,为宫颈癌的预防、高危人群的筛查和特异性疫苗的研制提供一定的试验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 标本取自 2006年 1月—2008年 6月来我院妇科住院就诊的 125例宫颈癌病例。其中经病理诊断鳞癌患者93例,腺癌患者 28例,鳞腺癌患者2例。

1.2 试剂与仪器 HPV基因分型检测试剂盒由深圳亚能生物技术有限公司提供;采用 Line-geme-fqd-33A PCR扩增仪。

1.3 采样 以专用的宫颈脱落细胞采集器进行采样,样本收集后立即送检待检测。

1.4 统计学方法 采用 SPSS 10.0软件包进行统计分析,计数资料采用 χ2检验,以p＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈癌患者 HPV感染率及主要基因型分布 125例宫颈癌患者标本中检测出 116例 HPV感染,阳性率为 92.8%。93例宫颈鳞癌中,HPV阳性 89例,阳性率为 95.7%。28例腺癌中,HPV阳性 22例,阳性率为 78.6%。在 2例鳞腺癌中分别检出 HPV6、18。

2.2 宫颈癌标本中不同 HPV基因型的感染率 125例宫颈癌患者标本中分别检测出 9种 HPV基因型,分别为 HPV6、11、16、 18、31、 33、 45、 58、59型。在所有 116例感染 HPV的标本中,单一感染较为常见,共计 85例占 73.3%,主要为HPV16、18感染;单一低危型 (HPV6、11)3例,占 2.6%;双重感染 22例,占 17.6%,其中包括 HPV16/18型 6例,HPV16/33型 5例,HPV11/16型 5例,HPV10/59型 1例;多重感染 9例,占 7.8%,主要表现为高低危型混合感染 (见表1)。

表 1 125例宫颈癌 HPV基因型的检出率Table 1 The detected ratios of HPV genotypes in 125 cervical cancer patients

3 讨论

宫颈癌是威胁妇女健康的主要恶性肿瘤之一,全世界每年约有 50万宫颈癌新发病例,其中亚洲约占 38万,全世界每年约有 23万女性死于宫颈癌。我国每年约有 15万宫颈癌新发病例,每年约有 8万人死于宫颈癌[1-3]。在我国,由于筛选制度尚不完善,普及面不广泛,加之很多妇女对宫颈疾病的危害认识不够,宫颈癌的发病率明显高于发达国家。现有的流行病学和生物学资料已经证明,高危型 HPV持续感染是宫颈癌及其癌前病变的主要病因[4]。统计结果表明,90%以上的宫颈癌均可检测到 HPV DNA[5]。我国宫颈癌高发区的筛选资料也显示,几乎所有的宫颈癌 HPV均阳性[6]。本研究中宫颈癌患者宫颈脱落细胞标本中 HPV感染率为 92.8%,其中鳞癌 95.7%、腺癌 78.6%,说明 HPV感染的基因型与宫颈癌的类型密切相关。宫颈癌中 HPV检出率因地区标本类型和检测方法不同而有差异,国际肿瘤研究所 (IARC)曾报道,宫颈癌组织中总的HPV感染率高达 99.7%[7]。日本学者应用特异性 PCR的方法检测 383例宫颈癌的 HPV,检出率为 86.3%[8]。本研究应用基因芯片技术对 125例宫颈癌脱落细胞进行检测,结果显示HPV感染率达 92.8%,与目前普遍认为的 90.0%宫颈癌组织携带有 HPV DNA的观点相符。HPV基因型分布有地区差异,2003年 Clifford等[9]对全球各大洲 10 058例宫颈癌进行了分析,发现 HPV16为全球最主要的基因型,而其他基因型在各地区的分布有所差异,如 HPV45在非洲相对较多,HPV33在欧洲相对较多,而 HPV52、58在亚洲较多。Lo等[10]对北京、上海、广州、四川和香港5个地区 809例宫颈癌患者进行HPV检测,结果发现 HPV16所占比例为 79.6%,并显示宫颈癌中主要 HPV基因型是 HPV16、18、58、52,其构成比分别为79.6%、7.50%、3.80%和 2.36%。而 Clifford等研究发现宫颈癌中常见基因型及其感染率从高到低依次为 HPV16、18、33、45、31、58、52。本研究通过对 125例宫颈癌患者中 HPV基因型的检测发现,各基因型检出率由高至低依次为 HPV16、18、59、33、58,结果与 Lo等报道结果一致,表明 HPV16为最主要的基因型,HPV18位居第二,其他各基因型所占比例较少。本研究中 HPV18的感染率为 19.8%,比 Lo等报道的7.50%和洪蝶等[11]报道的 3.5%更高,而与 Clifford等报道的结果相近。本研究在 125例宫颈癌 HPV检测中发现 6例(4.25%)HPV59感染与文献报道不一致,提示各地区宫颈癌中感染的 HPV基因型存在差异。此外还发现少数标本中存在HPV31、33、45高危型,但感染率较低,表明该地区宫颈癌患者感染 HPV基因型的多样化,并以高危型为主。

文献报道宫颈癌患者 HPV双重感染并不少见,但各家报道的感染率不一致。本研究发现汕头地区宫颈癌 HPV双重感染达 17.6%,与Kay等[12]报道的 16.0%相近,高于洪蝶等[11]报道的 9.5%。有学者报道,HPV16是双重感染中最常见的基因型,HPV16、18、33常有双重感染,故认为 HPV的多重感染与 HPV基因型有关[13]。本研究 HPV双重感染的 22例均含有 HPV16。不同地区不同种族人群对不同的 HPV基因型的易感性不同,而且不同的 HPV基因型对不同种族人群致癌性的强弱也存在差异[14]。本研究应用基因芯片对宫颈癌患者宫颈脱落细胞进行检测,结果显示汕头地区宫颈癌患者中 HPV的基因型多样,且均为高危型感染,早期对广大女性进行 HPV检测,能及时发现和确定宫颈癌高危人群,预防和早期发现宫颈癌及癌前病变都具有重要的意义。

1 王金行,吴广平.沈阳地区人乳头瘤病毒感染与宫颈疾病关系的研究 [J].中国全科医学,2010,13(10):3242.

2 张东红,林美珊.人乳头瘤病毒在国人宫颈病变中感染及型别分布特征的 Meta分析 [J].中国全科医学,2010,13(4):1287.

3 涂权梅,邱海凡,刘奕,等 .人乳头瘤病毒检测筛查早期宫颈癌的意义——妇科门诊 3 700例人乳头瘤病毒筛查分析 [J].中国全科医学,2010,13(5):1611.

4 Frei E.Clinical cancer research:an embattled species[J].Cancer,1982,50(10):1979-1992.

5 Kuhn L,Denny L,Pollack A,et al.Human papillonmavirus DNA testing for cervical cancer screening in low resurce settings[J].J Natl Cancer Inst,2000,92(10):818-823.

6 赵方辉,李楠,马俊飞,等 .山西省襄恒县妇女人乳头瘤病毒感染与宫颈癌关系的研究 [J].中华流行病杂志,2001,22(5):375-379.

7 Haverkos H,Rohrer M,Pickworth W.The cause of invasive cervical cancer could be multifactorial[J].Biomed Pharmacother,2000,54(1):54-59.

8 Maehama T.Epidemiological study of human paplomavirus infection of the uterine cervix in Okinawa,Japan[J].Infect Dis Obstet Gynecol,2005,13(2):77-80.

9 Clifford GM,Smith JS,Plummer M,et al.Human papillo mavirus typesin invasive cervical cancer worldwide:a meta-analysis[J].Br JCancer,2003,88(1):63-73.

10 Lo KW,Wong YF,Chan MK,et al.Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer:a multi-center study in China[J].Int Cancer,2002,100(3):327-331.

11 洪蝶,吕卫国,叶枫,等.宫颈癌及上皮内瘤变人乳头瘤病毒基因型的检测 [J].现代妇产科检测,2006,15(1):36-38.12 Kay P,Soelers R,Nevin J,et al.High prevalence of HPV16 in South African women with cancer of cervix and cervical intraepithelial heoplasia[J].J Med Virol,2003,71(2):265-273.

13 陈仲波,羊正炎,俞华,等.宫颈癌患者人乳头瘤病毒基因分型的研究 [J].中国全科医学,2010,13(6):1871.

14 Levi JE,Keler B,Quint WG,et al.High prevalence of HPV infections and high frequency of multiple HPV genotypes in human immunodeficiency virus infected women in Brazil[J].JClin Microbiol,2002,40(9):3341-3345.