王红梅，朱 艳，陈玉梁

(1.甘肃省农科院生物技术研究所,甘肃 兰州 730070；2.兰州大学生命科学学院，甘肃 兰州 730000)

牛皮蝇蛆病是由牛皮蝇、纹皮蝇和中华皮蝇的幼虫寄生于牛或牦牛背部皮下组织所引起的疾病的统称[1]，其危害牛的健康和皮革品质，是草原放牧牛最常见和危害最严重的寄生虫病之一，每年给畜牧业造成巨大的经济损失。同时，皮蝇幼虫还可寄生于人体，因而该病是一种人畜共患病[2-3]。

皮蝇的Hypodermin A (HA)是皮蝇幼虫感染牛后能首先检测到的重要抗原之一，也是牛皮蝇蛆病免疫诊断和基因工程疫苗研究的选择性抗原[4]。纯化的HA蛋白免疫牛后，可刺激机体产生抗体，有效地抵抗病原的侵袭，为寄生虫病疫苗的研制提供了依据[5]。由于提供足够量的天然HA具有相当大的难度，基因重组技术为免疫抗原的需求提供了平台。有研究者采用大肠杆菌、果蝇、杆状病毒和毕赤酵母等4种表达系统对HA蛋白进行了体外表达研究[6]，发现大肠杆菌表达系统由于不具有蛋白质二级结构折叠与修饰作用，所表达的HA蛋白不具有酶活性；HA在果蝇表达系统中的表达，产量可达到25 mg/L，但其无血清培养液过于昂贵，难以推广应用；采用杆状病毒表达HA蛋白，所获产量过低，无法满足生产的需求；毕赤酵母蛋白表达产量高，是兼有真核表达系统翻译后修饰功能及原核表达系统方便、简单和生产成本低等优点的表达系统，为免疫抗原蛋白的生产提供了新的途径。

紫花苜蓿(Medicagosativa)富含蛋白质、多种维生素和矿物质，是多种家畜喜食的优质饲草，素有“牧草之王”的美称，是一种生产植物蛋白的巨大资源宝库[7]，在实验室中又是牧草研究的模式植物。……