邴爱英 宋文刚

(泰山医学院，山东 泰安 271016)

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs) 亦称骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)，是主要存在于机体骨髓腔中的一种干细胞, 在一定的诱导条件下, 可分化为多种胚层细胞[1-2]，更重要的是骨髓间充质干细胞具有较强的免疫调节功能, 进行异体移植时可避免免疫排斥反应[3], 故对骨髓间充质干细胞的研究越来越受到广泛的关注。

20世纪70年代中期，Friedenstein等首次报道，骨髓标本中小部分贴壁细胞在培养过程中能够分化形成类似骨、软骨的集落，并将之称为骨髓多能间充质干细胞(marrow pluripotent stromal cells)，又称BMSCs。1997年，Prockop成功分离出BMSCs，发现其具有多向分化潜能，可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经样细胞和成肌细胞等。近年来，人们在研究中建立了人、猴、兔、大鼠等不同种属BMSCs的培养体系，其取材部位及方式等各有不同。

1 骨髓间充质干细胞的分离与培养

BMSCS的含量很低，约占骨髓有核细胞的0.001%～0.010%左右，并且随着年龄增长递减，要利用BMSCS就必须实现BMSCS的体外分离培养和扩增。目前对骨髓间充质干细胞的分离、纯化、培养还没有统一的方法，现在较为常用的分离方法主要有：贴壁筛选法、密度梯度离心法、流式细胞仪和免疫磁珠分离法。前两种方法获得的骨髓间充质干细胞成分复杂，纯度不够高。而用流式细胞仪和免疫磁珠分离技术虽然可获得高纯度的骨髓间充质干细胞，但对细胞活性和分化能力有较大影响，而且实验条件要求高，需要骨髓量较大。目前最常用的是贴壁筛选法与密度梯度离心法相结合的方法，既可以增加分离BMSCs的纯度，又避免影响BMSCs的活性，而且操作简便，成本不高[4]。……