棉花蛋白提取方法及其蛋白质组学研究进展
2011-04-13林必博
山西农业科学 2011年7期
林必博
(杨凌职业技术学院,陕西 杨凌 712100)
蛋白质组是指由一个细胞或一个组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质。蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象的学科,其主要研究技术双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)可在同一张凝胶上分离上千种蛋白质,具有大规模、高通量的特点[1]。蛋白质组学研究不仅可以分析有机体内基因组所表达的整套蛋白质,而且可提供大量有机体在各种生理状态下蛋白质动态变化的信息,深入揭示有机体代谢调控的本质。棉花(Gossypum hirsutum L.)是最有经济价值的纤维作物,也是重要的油料植物[2],其研究一直以来受到广泛关注。
本文主要介绍了棉花蛋白质组学研究中,用于蛋白质样品提取的2-DE方法以及棉花蛋白质组学的研究进展。
1 棉花蛋白质样品提取方法
在蛋白质组学研究中,蛋白质样品的质量好坏决定于2-DE是否能获得高分辨率的凝胶图谱和后续分析的准确性。通常来讲,所取材料的成分越复杂,蛋白质样品的制备越困难。棉花组织特别是研究的重点对象棉纤维和胚珠,是一种典型的顽拗性植物组织,含有多糖、酚类复合物、脂类、萜类以及大量的次级代谢物。因此,如何从棉花组织中提取高质量的蛋白质样品用于蛋白质组学研究显得尤为关键。Graves等[3]采用水法对棉花胚和纤维中的总蛋白进行了提取。林金科等[4]则采用尿素法进行了棉花蛋白质的提取,但2-DE凝胶图谱效果并不理想。徐子剑等[5]的研究也证明了2-DE凝胶图谱效果并不理想。……
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