陈玉强 房学东 王跃生 孟凡石 (吉林大学第二医院,吉林 长春 3004)

缺血再灌注(I/R)损伤是在缺血的基础上恢复血流后,组织器官的损伤反而加重的现象,是外科常见的一种损伤。由于小肠为体内最大的细菌库和淋巴库,小肠I/R除了会引起局部组织的损伤外,更会由于细菌和毒素的释放,移位到体循环而引起网状内皮系统发生系列反应,发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和多器官功能障碍综合征(MODS),是患者死亡的主要原因之一〔1〕。但是,细胞炎性介质释放的增加和细胞凋亡的产生以及脏器损害的发生机制,至今为止还不清楚。本文拟通过探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导细胞凋亡的同时以及半胱氨酸蛋白酶-8(caspase-8)表达的研究,对小肠缺血所引起的远隔脏器损害的发生机制进行分析,探寻一种全新的预防和治疗肠系膜血管缺血性疾病导致ARDS和MODS的方法。

1 材料与方法

1.1 材料 Caspase-8(1∶100)购自上海沪尚生物科技有限公司;TNF-α购自武汉博士德生物工程有限公司;Ultra SensitiveTM S-P超敏试剂盒(鼠/兔)和 DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.2 方法 健康雄性 Wistar大鼠 48只,清洁级,2～3月龄,体重 200～250 g,吉林大学实验动物中心提供。随机分为正常组、假手术组、对照组和实验组。10%水合氯醛腹腔注射(0.25 ml/100 g体重),麻醉满意后,取仰卧位固定。腹部常规消毒后无菌条件下取腹正中切口约 3～4 cm入腹,将肠管推向左侧,游离肠系膜上动脉,以无创伤动脉夹夹闭肠系膜上动脉起始部,缝合切口〔2〕。60min后经原切口进腹,取出动脉夹,恢复血供。……