杨思远,刘 琳,伍长学,胡选义△

(1.贵阳医学院附属医院心脏外科,贵州贵阳550004;2.贵州省人民医院呼吸内科,贵州贵阳550002; 3.泸州医学院附属医院胸心外科,四川泸州646000)

成体间充质干细胞内皮诱导方法的改进＊

杨思远1,刘 琳2,伍长学3,胡选义1△

(1.贵阳医学院附属医院心脏外科,贵州贵阳550004;2.贵州省人民医院呼吸内科,贵州贵阳550002; 3.泸州医学院附属医院胸心外科,四川泸州646000)

目的对现有成体间充质干细胞(M SCs)内皮分化诱导方法进行改进,以期找到更方便、更价廉并具有优良诱导效果的诱导方法。方法取生长良好的P3代M SCs,分为3组。诱导1组:以含10%胎牛血清(FCS)、10μg/L血管内皮生长因子(VEGF)、4μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的低糖DM EM培养基进行内皮诱导14 d;诱导2组:以含10%FCS、20μg/L VEGF、4μg/L bFGF的低糖DM EM培养基进行内皮诱导14 d;对照组:以含10%FCS低糖DM EM培养基培养14 d,均于倒置相差显微镜下观察细胞形态及排列方式变化,免疫组化检测Ⅷ因子相关抗原表达,免疫荧光检测CD31表达,透射电子显微镜观察细胞内超微结构。结果培养14 d后,诱导1、2组细胞均变为扁平状,呈“铺路石”样排列,Ⅷ因子相关抗原及CD31均高度表达,阳性率均大于90%,透射电镜发现细胞内有W-P小体形成。而对照组细胞未发现此类改变。结论联合使用低浓度VEGF及bFGF可使成体MSCs获得内皮系细胞的特征,是一种方便、价廉、有效的诱导方法。

间质干细胞;内皮细胞;诱导分化;方法

由干细胞介导的治疗性血管新生(therapeutic angiogenesis)已经成为临床上治疗缺血性心脏疾病新的方法,很多种类的胚胎干细胞及成体干细胞得到了广泛应用。……