李 颖，刘英娜，覃仕化，杨俊生，冷冬妮，王 珺，杜秀銮，汪 悦

类风湿性关节炎(rheumatic arthritis，RA)是一种临床常见的疾病，是一种不明原因的慢性炎性多系统性自身免疫性疾病，RA 患者的关节囊和关节周围韧带组织的挛缩、变形是影响RA 患者关节置换后功能康复的重要原因［1］。本研究通过牛Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的大鼠关节炎模型的韧带及关节囊组织的病理观察和相关细胞因子的研究，探讨大鼠类风湿性关节炎动物模型(CIA)中的韧带组织的浸润机制及不同时期的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α，TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2，IL-2)的变化趋势。

1 材料与方法

1.1 材料 Wister 大鼠90 只(上海斯莱克公司提供)，体重180 ～220 g，8 周龄左右，雌雄各半，常规条件饲养。随机分成三组:正常组、CIA 组、加强CIA 组各30 只。

1.2 配置CⅡ乳剂 用0.1 ml/L 的冰醋酸先溶解CⅡ，浓度为4 mg/ml，放置4℃冰箱过夜，与弗氏完全佐剂(上海sigma 医学试剂有限公司)等体积混合，震荡乳化制成CⅡ乳剂，置于4℃冰箱保存。

1.3 造模 将配置好的CⅡ乳剂以0.1 ml/只的剂量注射于大鼠的左足底，加强CIA 组于1 周后原部位再次注射同样剂量CⅡ乳剂。

1.4 取材 分别于最后一次注射后的第10 天、20天、30 天，分三次处死大鼠，取踝关节的韧带和关节囊组织，将所取组织分成两份，分别行组织匀浆和病理检查。

1.5 组织匀浆的方法 取新鲜组织洗净擦拭干净后立即放入－70℃冰箱中冷冻保存，以备匀浆。匀浆方法如下:称取一定量的组织，以生理盐水(生理盐水的体积总量为组织块重量的9 倍)混合，倒入匀浆管中充分研碎，使组织匀浆化后，于4℃，3000 r/min 离心10 ～15 min，吸取上清液装入EP 管，放入－70℃冰箱冷冻保存，待检。……