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反胶束萃取植物血凝素前萃工艺研究

2011-03-07刘艳艳李继昌

东北农业大学学报 2011年5期
关键词:方法

刘艳艳,秦 光,李继昌

(东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030)

植物血凝素(Phytohaemagglutinin,PHA)是从芸豆种子中提取的植物糖蛋白,具有广谱抗病毒和增强机体的免疫力的作用,是一种药用价值较高的生物产品,在临床上可以与许多药物同时使用,具有协同或相加作用,能明显提高药物的疗效;植物血凝素无种属特异性,可广泛用于家禽[1]、猪[2]、牛等动物以增强免疫力;也可以与疫苗同时使用,起到弥补免疫空白期、缓减疫苗应激反应和增强免疫效果的作用。

反胶束提取蛋白质是近十多年兴起的一种新型分离技术,具有生产周期短、处理量大、溶剂可循环使用、蛋白质纯度及萃取率均较高、可连续操作等许多优点而受到关注[3-8]。但在前萃取时,操作顺序存在一定差异,磨礼现等采用盐溶液饱和的反胶束体系与原料粉混合提取[3],Nascimento等采用原料、盐溶液、反胶束同时混合提取[9]。本文采用琥珀酸二辛脂磺酸钠/异辛烷形成的反胶束体提取水溶液中的PHA,对前萃取的操作顺序及方法进行初步的研究,考察影响PHA前萃的因素,根据正交试验确定最佳前萃工艺。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

芸豆(购于哈尔滨市某大型超市产地为黑龙江省),将其粉碎为20目细粉;AOT(Fluka公司产品,批号138115844108164);血清白蛋白(Biotech Grade,批号A0332);聚乙二醇20000(国药集团,批号F20061106);氯化钠、氯化钾、氯化钙、异辛烷等均为分析纯,所用水为去离子水。

1.2 仪器与设备

UV-7504紫外-可见分光光度计(上海精科仪器);FW-135中草药粉碎机(天津泰斯特);KQ3200E型超声波仪(昆山市超声仪器厂);……

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