新城疫病毒HN基因的克隆及在苜蓿中的表达

2011-02-24杨红军王豪举

中国兽医杂志 2011年1期

关键词：植物

杨红军,王豪举

(1.西南大学资源环境学院,重庆北碚 400715;2.西南大学动物科技学院,重庆北碚 400715）

鸡新城疫(ND）1926年首次在印度尼西亚的爪哇和英国的纽卡斯尔艾佛顿暴发。该病是由新城疫病毒(NDV）引起的一种以呼吸道、消化道黏膜出血为典型病变的高度接触性、急性败血性禽类传染病。ND的预防目前采用灭活苗和弱毒苗接种,但它干扰流行病学调查和监测,不利于控制ND的流行和传播。也使应用受到限制,但在世界范围内仍是危害养鸡业的重要传染病之一[1]。

转基因植物疫苗(transgenic p lant vaccine）是把植物基因工程技术与动物机体免疫机理相结合,生产出能使动物机体获得特异抗病能力的疫苗[2]。动物试验已经证实,转基因植物表达的抗原蛋白经纯化后仍保留了免疫学活性,注入动物体后能产生特异性抗体;用转基因植物组织饲喂动物,转基因植物表达的抗原呈递到动物的肠道淋巴相关组织,被其表面特异受体特别是M细胞所识别,产生黏膜和体液免疫反应[3-9]。

本试验通过 RT-PCR获得新城疫病毒LaSota株血凝素-神经氨酸苷酶(HN）基因,定向克隆到植物表达载体pBI121中,构建了含有LaSota株HN基因的表达重组质粒 pBI121-HN,并通过 SDSPAGE对其在苜蓿中表达进行了初步的探讨,为利用植物作为生物反应器奠定了基础。