张 韧，秦玉明，陈文庆，刘华杰，王建超，高 飞

(1.北京清大天一科技有限公司，北京 102200;2.中国兽医药品监察所，北京 100081)

目前，国内生物疫苗生产企业生产细胞培养的抗原时，普遍采用传统的转瓶细胞培养工艺，该方法存在细胞密度低、病毒产率低、生产成本高、劳动强度大等缺点。诞生于20世纪60年代的悬浮培养技术可以进行大规模细胞培养，能够获得大量的病毒产物和高质量的疫苗产品，在国外疫苗生产中普遍应用。悬浮培养技术是在生物反应器中、人工条件下高密度大规模培养动物细胞用于生物制品生产的技术，根据细胞是否贴壁，分为悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体悬浮培养。悬浮培养技术最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段，在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。

1 悬浮培养技术在生物制药中的应用历史和现状

1962年，Capstick等对BHK21细胞驯化实现悬浮培养［1］，并用于兽用疫苗生产［2］。1967 年，Van Wezel开发了微载体［3］并实现在生物反应器中大规模培养贴壁细胞。悬浮培养与微载体培养标志着细胞大规模培养技术的开始，细胞生产病毒疫苗也成为细胞大规模培养技术生产生物制品的第一次浪潮。20世纪80年代后，CHO细胞实现悬浮培养，治疗性抗体生产技术的发展极大地推动着生物反应器在生物制药行业中的应用，到20世纪末已进入万升级规模［4］。2000年以后，随着流加培养、灌注培养、个性化细胞培养基等技术的发展，作为大规模培养主要设备的生物反应器规模也趋向大型化和简单化。……