黄青松 牛志国 袁理想 李焕焕 宋向凤 (新乡医学院微生物学教研室,新乡453003)

17-β-雌二醇对HMGB1过表达THP1细胞的细胞周期进程的影响①

黄青松 牛志国②袁理想③李焕焕③宋向凤②(新乡医学院微生物学教研室,新乡453003)

目的:研究17-β-雌二醇联合HMGB1的过表达对人单核细胞系THP1细胞细胞周期和NF-κ B转录因子的影响。方法:血清饥饿法同步化细胞周期后,利用脂质体法将pFLAG-CMV-HMGB1转染THP1细胞;10-9mol/L 17-β-雌二醇刺激同步化THP1细胞16、30小时后,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-qPCR检测Cyclin A、Cyclin D1的mR NA表达水平,免疫印迹检测HMGB1蛋白的表达;荧光素酶报告基因检测NF-κ B的活性。结果:HMGB1过表达的THP1细胞中HMGB1蛋白的表达水平比正常THP1细胞要高3.7倍,血清饥饿法成功将THP1细胞周期同步化,同步化后G0/G1期细胞百分数由53%上升到78%;17-β-雌二醇刺激HMGB1过表达细胞30小时后出现Cyclin A mRNA表达上升为原来的7.9倍,而Cyclin D1mRNA表达明显下降,G1期细胞百分比由53.11%下降为33.33%,S期细胞百分比由35.43%上升为53.91%,此改变在刺激后30小时达到最大值;NF-κ B活性在17-β-雌二醇刺激HMGB1过表达细胞明显升高,且时间上提前于细胞周期动力学改变。结论:雌激素对THP1细胞周期调节依赖HMGB1,NF-κ B可能参与其中。

17-β-雌二醇;HMGB1蛋白;细胞周期;THP1细胞

10.3969/j.issn.1000-484X.2011.07.010①本文为河南省教育厅基金项目(No.200510472009)和新乡医学院大学生科研创新计划项目(No.2010005)

许多研究证实高迁移率族蛋白B1(High mobility group box-1,HMGB1)作为一种炎症介质和致炎细胞因子,是启动和维持炎症级联放大效应的中心分子,与多种疾病包括自身免疫病、肿瘤发生发展浸润转移等发病机制关系密切,甚至包括核苷酸免疫,已成为近年危重医学研究的热点之一[1-3]。……