柳春兴 戴汶灼

养血止痛颗粒稳定性试验研究

柳春兴 戴汶灼

目的用初均速法预测养血止痛颗粒的有效期。方法以养血止痛颗粒中主要成分阴丹参酮和丹参酮ⅡA为指标,采用薄层扫描法定量预测有效期。结果以阴丹参酮为标准,则2.35a,以丹参酮ⅡA为标准,则结论 本试验用薄层扫描法测定两种成分的含量,用初均速法预测有效期,方法简便合理,结果可靠。

养血止痛颗粒;初均速法;稳定性试验

养血止痛颗粒是本院经验方,由丹参、香附、鸡血藤等药物组成,具有养血舒经,活血化瘀、通利关节、理气止痛的功效。本试验采用薄层扫描法定量,初均速法[1]预测养血止痛颗粒中阴丹参酮和丹参酮ⅡA的稳定性,方法简便,可靠。

1 仪器、试剂与样品

自制恒温装置一套:加热盒一个,1/1050-150℃精密温度计一支,XMT-02型数字控温仪一台。控温精度 ±0.3℃。CS-920薄层扫描仪,日本岛津。定量毛细管,美国。养血止痛颗粒 (批号:20100802、20100908、20100706、20100809),由本院提供。丹参酮ⅡA、阴丹参酮购于中国药品生物制品检定所。所用试剂均为分析纯。

2 样品液的制备

精密称取养血止痛颗粒剂 5g,用 100ml乙醚于 50℃水浴上索氏提取器回流提取 3h。提取液回收乙醚致尽,残留物用无水乙醇溶解,定量转移至 10m l量瓶中,定容作为供试液。

3 标准曲线的制备

分别精密称取丹参酮ⅡA和阴丹参酮对照品,用无水乙醇定容,制成 0.16mg/ml的丹参酮ⅡA和 0.15mg/m l的阴丹参酮作为对照溶液。分别吸取以上对照溶液各 0.5,1,2,4,6μl,于 10×10cm硅胶 G薄层板上上样,以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(85∶15)为展开剂,分离丹参酮Ⅱ A。以石油醚(60℃ ～90℃)-乙酸乙酯(85∶20)为展开剂,分离阴丹参酮。薄层经 60℃ ～80℃干燥 5min,分别在丹参酮ⅡAλ=260nm,阴丹参酮λ=255nm波长处扫描,以峰面积对对照品斑点浓度计算,得回归方程和相关系数分别为:丹参酮ⅡA:Y=40.48+5526.9x,γ=0.9995,阴丹参酮:Y=-12.91+5640.48x,γ=0.9999。

4 样品分析

分别吸取供试液和丹参酮ⅡA(或阴丹参酮)对照液各2μl,点于同一硅胶G薄层板上,按“标准曲线制备”项下方法展开,扫描,取供试液和对照液中丹参酮ⅡA或阴丹参酮斑点的面积积分值计算,即得。

5 回收率试验

称取养血止痛颗粒处方比例组成的丹参空白药物粉末5g,精密加入不同量的阴丹参酮对照品,按上述方法制备、上样、展开、扫描、并计算回收率得 6次回收率的均值 x=102.62%,变异系数CV=3.53%。

6 加速破坏试验

将养血止痛颗粒(共 4个批号 20100802、20100908、20100706、20100809)每个批号 1袋(6g)装入 20m l具塞试管中,放置于恒温加热盒里,按以下温度和时间加热。进行恒温加速破坏试验。到时间后立即取出,用冷水冷却至室温,终止反应。试验条件见表1。

表1 养血止痛颗粒加速破坏试验

7 实验结果

7.1 加速破坏试验测定结果 以初始浓度为 C0将在不同加速温度(Ti)和相对应时间(ti)时所测定的4个批号的养血止痛颗粒中阴丹参酮和丹参酮ⅡA的浓度分别转换成残存率,并取均值 Ci。见表2。

表2 加速破坏试验中丹参酮ⅡA和阴丹参酮数据表

7.2 数据处理的数学模型 按下式计算不同温度时的初速度(V0i):

8 讨论

初均速法预测药物有效期,不需要判断反应级数,方法简便,且与经典恒温加速法相比精确度也不下降[1-2]。

丹参是养血止痛颗粒中的主要药物之一,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功能。丹参酮ⅡA和阴丹参酮是丹参中比较明确的有效成分。本实验用薄层扫描法测定两种有效成分的含量,用初均速法预测药物有效期,方法简便合理,结果可靠。

[1] 庞贻慧,等.药学学报,2007,17(3):209.

[2] 赵仁泰,等.中成药,2008,13(4):23.

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