那思家，黄 芳，郭维华，宫 坤，金 岩，李德超

(1.佳木斯大学口腔医学院口腔颌面外科，黑龙江佳木斯 154007;

2.第四军医大学口腔医学院组织工程中心，陕西西安 710032)

牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性的研究

那思家1，黄 芳1，郭维华2，宫 坤2，金 岩2，李德超1

(1.佳木斯大学口腔医学院口腔颌面外科，黑龙江佳木斯 154007;

2.第四军医大学口腔医学院组织工程中心，陕西西安 710032)

目的:探讨牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性。方法:采用胶原酶消化人牙周膜组织，获得牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells，PDLSCs)，经体外鉴定、扩增后构建PDLSCs细胞膜片，并通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)对PDLSCs细胞膜片形态学进行检测。此外，细胞膜片厚度及膜片中细胞密度也被检测。结果:PDLSCs成功被分离、培养、鉴定，并且PDLSCs体外培养2周后，获得白色膜状PDLSCs细胞膜片。倒置显微镜下观察显示，细胞复层生长，细胞呈典型的纺锤状。体式显微镜下观察显示，细胞与细胞之间紧密连接。组织学观察显示，细胞与细胞之间存在着大量细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)。扫描电镜下观察膜片表面显示，细胞在膜片上充分伸展，细胞之间紧密连接。PDLSCs细胞膜片厚度由起初的(48±3.2)μm到3周后的(69±3.4)μm，但在第2周细胞厚度(64±3.3)μm，变化最明显。细胞膜片中的细胞密度检测显示连续培养3周后仍然有大量具有活性的细胞存在，然而细胞密度在第2周时最大。结论:本研究证明我们已经成功探索出一套稳定、可靠的PDLSCs细胞膜片构建方法，为利用PDLSCs细胞膜片修复、再生牙周组织及牙周缺损提供了一定的技术保证。……