李先伟 杨解人 (皖南医学院药理学教研室，安徽 芜湖 241001)

五味子乙素抗H2O2诱导PC12细胞凋亡的机制

李先伟 杨解人 (皖南医学院药理学教研室，安徽 芜湖 241001)

目的 探讨五味子乙素(Sch B)抗H2O2诱导PC12细胞凋亡的影响及机制。方法 在H2O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上，采用MTT比色法分析细胞存活率;Hochest33258荧光染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平;Real Time PCR和Western印迹检测p53基因mRNA和蛋白的表达。结果 不同剂量Sch B处理PC12细胞48 h后，可剂量依赖性对抗H2O2引起的细胞凋亡，提高细胞存活率，减轻H2O2导致的细胞核固缩、聚集和碎裂，降低细胞内ROS的含量，抑制p53基因mRNA和蛋白的表达。结论 Sch B可剂量依赖性对抗H2O2诱导的PC12细胞凋亡，其机制可能与其抗氧化、下调促凋亡基因p53的表达等有关。

五味子乙素;PC12细胞;凋亡;活性氧;p53

五味子乙素(Sch B)是从中药五味子分离得到的有效成分之一，体内外研究表明Sch B具有明显清除自由基和抑制脂质过氧化作用〔1，2〕，提高大鼠脑细胞线粒体抗氧化能力和保护大鼠脑缺血-再灌注损伤〔3〕，但其神经保护作用的机制目前还不清楚。PC12细胞由于其本身的特性常用作神经元模型。本研究采用H2O2诱导PC12细胞凋亡，观察Sch B对凋亡的PC12细胞内活性氧(ROS)含量、细胞周期进程、p53基因表达等方面的影响，探讨Sch B抗H2O2诱导PC12细胞凋亡的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 Sch B，纯度98%(成都思科华生物技术有限公司);PC12细胞株(中国科学院上海细胞库);DMEM培养基(北京索莱宝);马血清、胎牛血清(Hyclone);噻唑蓝(MTT);细胞周期与细胞凋亡检测试剂……