转基因DT40细胞导入早期鸡胚后的分布及绿色荧光蛋白表达的研究
2011-01-30靳文静张文新李赞东
中国比较医学杂志 2011年9期
关键词:检测
孙 鹏,赵 晨,燕 丽,靳文静,张文新,李赞东
(1.中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室,北京 100193;2.北京教育考试院,北京 100083)
随着重组DNA技术的迅猛发展,动物转基因技术的研究取得了一系列可喜的进展。这种基因转移技术为人类提供了从遗传上改变高等动物细胞的能力,并成为制备转基因动物和进行基因治疗的基础。把经基因改造的细胞移植到动物体内将可能为生产药用蛋白[1]或者进行基因治疗[2]提供一种更加经济的途径。但是,对于许多高等动物,特别是具有完善的免疫系统的脊椎动物,基因传递系统存在潜在的免疫刺激性,异源基因的表达容易引起宿主产生免疫应答,进而将降低异源基因表达产物的量甚至将其完全消除[1,3-5]。Mohammed等[1]将重组的人免疫球蛋白(rh IgG3)基因转入鸡法氏囊淋巴细胞系(DT40)后再将后者通过静脉注射到产蛋母鸡体内,在注射细胞6d后宿主鸡所产蛋中可通过ELISA检测到rh IgG3,该蛋白含量在注射12d后的蛋中达到最高峰,但在此之后骤然下降,这可能是宿主对 rh IgG3产生了免疫应答的结果。要解决这一问题,需要使宿主动物对异源蛋白形成免疫耐受。根据 Burnet提出的抗体产生克隆选择学说[6],有研究人员在鸡胚发育早期将异源蛋白注射到胚胎内,可以诱导出生后的鸡对此抗原的免疫耐受[7]。
禽类的胚胎发育模式与哺乳动物存在很大差异,前者的胚胎发育是在离开母体的密闭蛋壳内独立完成的,可以在不停止胚胎发育的情况下对其进行研究,这使得胚胎血管微注射外源物质的方法成为对禽类进行研究的一种重要手段[8-11]。……
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