朱丽华 季锦衣 吴小芹 王张丽 叶建仁

(南京林业大学，南京，210037)

一种制备无菌松材线虫的方法1)

朱丽华 季锦衣 吴小芹 王张丽 叶建仁

(南京林业大学，南京，210037)

报道了一种通过用H2O2处理松材线虫卵进而获得无菌松材线虫的方法。实验结果表明，15％H2O2处理对松材线虫卵有一定影响，随着处理时间延长，松材线虫孵化率下降，处理30min以上使其孵化率降低至10％以下;15％H2O2处理时间对获得无菌松材线虫有较大影响，其中，处理60min后获得无菌线虫的机率达70％。在无菌条件下，用无菌松材线虫对赤松无菌组织培养幼苗进行接种能使其发生萎蔫，表明采用该方法制备无菌松材线虫并未使其失去致病性，是一种成功的方法。

松材线虫;H2O2;无菌;致病性

松材线虫病是松树的一种毁灭性病害，对日本、韩国和中国等多个国家的松林及森林生态系统造成极大的危害并导致巨大的经济损失。长期以来松材线虫[Bursaphelenchus xylophilus(Steiner＆Burher)Nickle]被认为是该病的惟一病原[1-3]。Oku等[4]曾提出感病松树的快速萎蔫可能与松材线虫携带的细菌有关，以后又有一些研究者相继报道松材线虫体表携带有各种细菌[5-9]。有关细菌在松材线虫致病过程中的作用引起了国内外学者的关注。Kawazu等经过研究提出松材线虫病的真正病原是松材线虫携带的致病细菌[10-11];洪英娣等和Han等报道松苗萎蔫与线虫种类无关，而是由伴随细菌的种类决定[12-13];赵博光等提出该病是松材线虫和其携带致病细菌的复合侵染病害[14];谈家金等则提出松材线虫及其伴生细菌均是该病不可缺少的致病因素[15]。……