袁 斌，周岐新（重庆医科大学药学院药理教研室，重庆市400016）

产生β-内酰胺酶是革兰阴性杆菌重要耐药机制之一。AmpC酶与超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）作为当前最具临床意义的β-内酰胺酶，具有极高的研究价值。有学者将细菌同时产生质粒型AmpC酶和ESBLs定义为超-超广谱β-内酰胺酶（SSBLs）[1]。我们通过三维试验检测在川东北地区是否也存在同时产质粒介导AmpC酶和ESBLs的高度耐药菌株，通过聚合酶链式反应（PCR）实验确定AmpC酶与ESBLs基因型，建立一种可靠的实验室检测产SSBLs方法，指导临床合理用药，防止产SSBLs株的区域性流行。

1 实验材料

1.1 菌株

收集自2008年1月－2009年6月从川北医学院附属医院临床分离革兰阴性杆菌237株（非同一患者同一部位重复分离）。所有菌株均经过法国生物梅里埃公司的Vitek 32全自动微生物鉴定仪进行鉴定。质控菌株：标准质控菌株为大肠埃希菌ATCC 25922，肺炎克雷伯菌ATCC 700603为ESBLs阳性对照菌，由四川抗菌素工业研究所提供；阴沟肠杆菌029M为AmpC酶阳性对照菌，E.coli C600为川北医学院药理教研室李苌清博士惠赠。

1.2 试剂

氨苄西林（AMP）购自中国药品生物制品检定所，头孢西丁（FOX）购自海南轻骑海药股份有限公司，头孢曲松（CRO）购自上海新先锋药业有限公司，氨曲南（AZ）购自重庆圣华曦药业，阿米卡星（AMK）购自江苏吴中实业股份有限公司，亚胺培南（IMP）购自默沙东制药有限公司，头孢他啶（CAZ）、头孢哌酮（CPZ）、头孢噻肟（CTX）和头孢哌酮/舒巴坦（CPZ/SB）由哈药集团制药总厂提供，哌拉西林（PIP）购自齐鲁制药厂，头孢吡肟（FEP）购自施贵宝制药有限公司，左氧氟沙星（LEV）购自山西威奇达药业有限公司，哌拉西林/他唑巴坦（PIP/TZ）购自珠海联邦制药股份有限公司，克拉维酸（CA）、氯唑西林（CLO）购自中国药品生物制品检定所；……