β-乳球蛋白IgE抗原决定簇的识别
2010-09-13丛艳君任发政云战友
丛艳君,任发政,云战友
(1.北京工商大学化学与环境工程学院,北京 100048;2.中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;3.内蒙古伊利实业集团股份有限公司,内蒙古 呼和浩特 010080)
β-乳球蛋白IgE抗原决定簇的识别
丛艳君1,任发政2,*,云战友3
(1.北京工商大学化学与环境工程学院,北京 100048;2.中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;3.内蒙古伊利实业集团股份有限公司,内蒙古 呼和浩特 010080)
以β-乳球蛋白氨基酸序列为模板,错位合成β-乳球蛋白多肽,以收集到的牛乳过敏患者血清为抗体,鉴定β-乳球蛋白IgE抗原决定簇,分析影响致敏性的关键氨基酸,探讨牛乳过敏机理。结果表明:β-乳球蛋白IgE抗原决定簇有4条,氨基酸序列分别为17~31、72~86、92~106、152~166,并且苏氨酸(AA20)、蛋氨酸(AA23)、天冬氨酸(AA27)是影响β-乳球蛋白致敏性的关键氨基酸。说明特异性水解抗原决定簇或定点修饰氨基酸可以实现过敏原脱敏的目的。
牛奶;β-乳球蛋白;IgE;抗原决定簇
Abstract:A series of overlapping decapeptides (offset by five amino acids) were synthesized on the basis of the amino acid sequence of β-lactoglobulin. IgE-binding epitopes were identified using individual sera from cow milk allergic patients. In addition,we also identified critical amino acids (AAs) for IgE binding. The results showed that four IgE-binding epitopes were identified,which located in the sequences of AA 17-31, AA 72-86, AA 92-106 and AA 152-166, respectively. Threonine,methionine and aspartic acid were the critical amino acids for allergenicity of β-lactoglobulin.
Key words:cow milk;β-lactoglobulin;IgE;epitope
β-乳球蛋白占牛乳总蛋白的10%,乳清蛋白的50%。IgE介导的牛乳过敏中60%的病人对β-乳球蛋白过敏[1]。β-乳球蛋白一般是二聚体,其每个单位为18kD,含有162个氨基酸,5个二硫键,其中4个为链内,1个为链间。有关牛乳过敏原表位的研究在2000年左右最为活跃,其内容涉及到对B细胞表位(包括IgE表位和IgG表位)及T细胞表位的研究。Sélo等[2]在研究β-乳球蛋白时,确定了人的主要IgE表位为肽链1~8、25~40、41~60、102~124、149~162 位,同时21~40、42~60、107~117、148~162位也被致敏的大鼠所识别。而Fritsché等[3]研究表明:β-乳球蛋白氨基酸序列41~60、102~124、149~162位,这3个表位被90%~100%过敏患者的血清所识别,是主要过敏表位,肽链1~8、25~40、92~100位,被50%~65%过敏患者血清IgE所识别,为次要过敏表位。……
