李兴华，胡昌江，李文兵，黄勤挽，谢秀琼（成都中医药大学，成都市 611137）

益智仁醇提取物对动物胃肠运动的影响Δ

李兴华＊，胡昌江#，李文兵，黄勤挽，谢秀琼（成都中医药大学，成都市 611137）

目的：研究益智仁醇提取物对动物胃肠运动的影响。方法：采用小鼠在体胃肠运动实验和家兔离体肠肌运动实验，观察益智仁醇提取物对正常小鼠胃排空、小肠推进运动和家兔离体肠肌收缩的影响。结果：益智仁醇提取物在5、10、20 g·kg-1剂量下给药对正常小鼠胃排空有显著抑制作用，对家兔离体肠肌收缩有显著抑制作用，对氯化乙酰胆碱引起的肠肌兴奋有显著拮抗作用。结论：益智仁醇提取物对动物胃肠运动有抑制作用，其作用途径可能与M胆碱受体有关。

益智仁醇提取物；胃排空；小肠推进；离体肠肌

Δ国家科技支撑计划子课题（2006BAI09B06-09）

＊讲师，博士。研究方向：中药炮制学。E-mail：tangzhongli1981@163.com

#通讯作者：教授，博士研究生导师。研究方向：中药炮制学。E-mail：hhccjj@hotmail.com

益智为姜科植物益智Alpinia oxyphyllaMiq.的干燥成熟果实，主产于我国的海南和广东，为四大南药之一。其功效为温脾止泻、摄唾涎、暖肾、固精缩尿，主治脾寒泄泻、腹中冷痛、口多涎唾、肾虚遗尿、小便频数、遗精白浊[1]。《本草纲目》记载：“腹胀忽泻，日夜不止，诸药不效，此气脱也。用益智子仁二两，浓煎饮之，立愈。[2]”现代中医临床对于中焦虚寒或脾肾虚寒的泄泻，也多重用益智。笔者采用小鼠在体胃肠运动实验和家兔离体肠肌运动离体试验，观察益智仁醇提取物对动物胃肠运动的影响，以期探讨其止泻功效的作用机制。

1 仪器与材料

1.1 仪器

AS-HJ-Ⅱ型恒温平滑肌槽（成都遨生电子有限公司）；JH-2型肌张力传感器（北京航天医学工程研究所）；BL-420E型生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 试药

益智仁购于海南省医药总公司，经成都中医药大学卢先明教授鉴定为真品；硫酸阿托品片（广东邦民制药厂有限公司，批号：060204）；氯化乙酰胆碱（上海三爱思试剂有限公司，批号：20061130）。

1.3 动物

普通级新西兰家兔8只，♀♂兼用，体质量（2.0±0.5）kg；普通级昆明种小鼠50只，♂，体质量（20±2）g，均由成都中医药大学实验动物中心提供（动物生产许可证号：SCXK（川）2004-11）。

2 方法与结果

2.1 益智仁醇提取物制备方法

取益智仁100 g，粉碎，过1号筛，置2 000 mL圆底烧瓶中，加乙醇600 mL回流提取2次，每次1 h，纱布滤过，合并2次滤液，60℃以下减压回收溶剂，浸膏加吐温-80 5 mL，在研钵中充分研磨混匀，加蒸馏水配成100 mL，使充分乳化，即得。

2.2 益智仁醇提取物对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响

取小鼠50只，随机分为5组，即空白（5%的吐温-80）、硫酸阿托品（0.3 mg·kg-1）和益智仁醇提取物高、中、低剂量（20、10、5 g·kg-1）组。ig给药，给药1 h后每只小鼠ig营养性半固体糊（参照文献[3]配制）0.8 mL。30 min后脱颈椎处死小鼠，开腹，结扎胃贲门和幽门，取胃，用滤纸擦干后称胃全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后擦干，称胃净重，以胃全重和胃净重之差为胃内残留物质量，计算胃内残留物占所灌半固体糊的质量百分比为胃内残留率。同时迅速取出小肠，轻轻剥离后直铺于白纸上，测量幽门至回盲肠部全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离，以幽门至黑色半固体糊前沿的距离占幽门至回盲部全长的百分率为小肠推进率。结果，高、中、低剂量益智仁醇提取物均对正常小鼠的胃排空有显著性的抑制作用（P＜0.01），高剂量益智仁醇提取物对正常小鼠的小肠推进有显著性抑制作用（P＜0.05），且其作用有随剂量递增而增大的趋势。益智仁醇提取物对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响见表1。

2.3 益智仁醇提取物对正常家兔离体肠肌收缩的影响

表1 益智仁醇提取物对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响（±s，n＝10）Tab 1 Effects of EEAO on the evacuation of stomach and intestinal propulsive movement in mic（e±s，n＝10）

表1 益智仁醇提取物对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响（±s，n＝10）Tab 1 Effects of EEAO on the evacuation of stomach and intestinal propulsive movement in mic（e±s，n＝10）

与空白组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.blank group：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

剂量/g·kg-1组别空白组益智仁醇提物低剂量组益智仁醇提物中剂量组益智仁醇提物高剂量组硫酸阿托品组-51 0小肠推进率/%49.55±11.75 49.20±19.66 46.76±12.03 38.75±9.05＊33.66±16.64＊20 0.000 3胃内残留率/%25.38±13.95 48.74±19.95＊＊55.97±12.05＊＊74.55±14.20＊＊53.06±10.81＊＊

实验分为5组，即正常（克氏液）、空白（5%的吐温-80）和益智仁醇提取物高、中、低浓度（0.003、0.002、0.001 g·mL-1）组。猛击家兔头部致昏，快速取出十二指肠，用克氏液漂洗干净，置于盛有低温克氏液的培养皿中。剪取2 cm肠段，置于盛有50 mL、（37±0.5）℃克氏液的平滑肌槽中，持续通以氧气。肠段的一端固定在肌槽底部的不锈钢弯钩上；另一端与肌张力传感器连接，后者接生物机能实验系统记录肠段的等长收缩活动。肠段负荷1 g张力，温育30 min，待肠段自发活动平稳，记录2 min正常收缩曲线。分别累积给予各种药液，每次加药体积为50 μL，记录给药后2 min收缩曲线，以给药前后肠肌收缩的平均张力计算抑制率。抑制率（%）＝（给药前平均张力－给药后平均张力）/给药前平均张力×100%。结果，高、中、低浓度益智仁醇提取物对正常家兔离体肠肌的收缩运动有显著抑制作用（P＜0.01），表现为使肠肌舒张，平均张力下降。益智仁醇提物对正常家兔离体肠肌活动的影响见图1、表2（表中正常组数值无意义故略去）。

图1 益智仁醇提取物对正常家兔离体肠肌活动的影响Fig 1 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbit

表2 益智仁醇提取物对正常家兔离体肠肌活动的影响（±s，n＝4）Tab 2 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbi（t±s，n＝4）

表2 益智仁醇提取物对正常家兔离体肠肌活动的影响（±s，n＝4）Tab 2 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbi（t±s，n＝4）

与空白组比较：＊P＜0.01vs.blank group：＊P＜0.01

组别空白组益智仁醇提物低浓度组益智仁醇提物中浓度组益智仁醇提物高浓度组浴槽内终浓度/g·ml-1-0.001 0.002 0.003抑制率/%0.22±0.79 18.32±6.41＊39.65±7.65＊51.11±8.55＊

2.4 益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱兴奋家兔离体肠肌活动的影响

分组及给药、肠肌制取同“2.3”项下方法操作，待肠段自发活动平稳后，在浴槽中加入1.0×10-5mol·L-1（浴槽内终浓度）的氯化乙酰胆碱，使肠肌出现持续性收缩，处于痉挛状态，记录2 min收缩曲线，再分别累积给予各种药液，操作同前，以给药前、后肠肌收缩的平均张力计算抑制率。抑制率（%）＝（给氯化乙酰胆碱后平均张力－给药后平均张力）/给氯化乙酰胆碱后平均张力×100%。结果，高、中、低浓度益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱引起的肠肌痉挛有显著性的拮抗作用（P＜0.01）。益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱兴奋家兔离体肠肌活动的影响见图2、表3（表中正常组数值无意义，故略去）。

图2 益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱兴奋家兔离体肠肌活动的影响Fig 2 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbit due to acetylcholine chloride

表3 益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱兴奋家兔离体肠肌活动的影响（±s，n＝4）Tab 3 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbit due to acetylcholine chlorid（e±s，n＝4）

表3 益智仁醇提取物对氯化乙酰胆碱兴奋家兔离体肠肌活动的影响（±s，n＝4）Tab 3 Effects of EEAO on the activity of isolated jejunum in rabbit due to acetylcholine chlorid（e±s，n＝4）

与空白组比较：＊P＜0.01vs.blank group：＊P＜0.01

组别空白组益智仁醇提物低浓度组益智仁醇提物中浓度组益智仁醇提物高浓度组浴槽内终浓度/g·ml-1-0.001 0.002 0.003抑制率/%2.70±1.06 33.25±3.54＊55.91±1.30＊68.49±4.05＊

3 讨论

胃肠运动功能是受体液调节和神经调节的复杂生理过程[4]，目前研究胃肠运动的实验方法可分为在体实验和离体实验。离体实验重现性好，易于操作，有助于揭示药物的作用机制，但在体实验更能体现药物的综合作用并预测其临床疗效，整体动物的胃排空和肠推进更能直观地体现动物胃肠肌运动状况。

本研究结果表明，益智仁醇提取物对正常小鼠的胃排空和小肠推进有明显的抑制作用，对家兔离体肠肌收缩有明显的抑制作用，对氯化乙酰胆碱引起的肠肌兴奋有明显的拮抗作用。提示益智仁醇提取物对胃肠运动有抑制作用，这一作用可能是益智仁温脾止泻、治疗脾寒泄泻的药理学基础之一。其作用途径除与M胆碱受体有关之外，是否还与影响胃肠运动功能的其他神经、体液因素相关，有待进一步深入研究。

[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：204.

[2]李时珍.本草纲目（校点本第二册）[M].北京：人民卫生出版社，1977：870.

[3]邢建峰，封卫毅，侯家玉.小鼠胃排空及小肠推进实验方法的探讨[J].北京中医药大学学报，2003，26（4）：50.

[4]李文胜，彭定国，屈万红，等.耳叶牛皮消对胃肠运动的作用及其机制研究[J].中国药房，2007，18（33）：2 575.

Effects of the Ethanol Extracts ofAlpinia oxyphyllaon Animal Gastrointestinal Activity

LI Xing-hua，HU Chang-jiang，LI Wen-bing，HUANG Qin-wan，XIE Xiu-qiong（Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China）

OBJECTIVE：To study the effect of ethanol extracts ofAlpinia oxyphylla（EEAO）on animal gastrointestinal activity.METHODS：Effects of EEAO on the evacuation of stomach，the propulsive movement of intestine and the extraction of isolated rabbit jejunum were observed by mice gastrointestinal activity test and isolated rabbit jejunum movement experiment.RESULTS：5 g·kg-1，10 g·kg-1，20 g·kg-1dose of EEAO could distinctly inhibited the evacuation of stomach in mice.EEAO could also inhibit the extraction of isolated rabbit jejunum.EEAO showed significant antagonistic effect on depression of EEAO on spasmodic muscle of duodenum due to acetylcholine chloride.CONCLUSION：EEAO could inhibit animal gastrointestinal activity，the mechanism of which may be associated with M-receptor.

Ethanol extracts ofAlpinia oxyphylla；Evacuation of stomach；Propulsive movement of intestine；Isolated jejunum

R285；R97

A

1001-0408（2010）39-3649-02

2009-11-27

2010-04-24）