赵伟礼吴周安黄兰芳郭方遒

（1.中南大学，长沙 410083；2.巨化集团公司，浙江 衢州 324004）

2-羟基-6-萘甲酸及其杂质含量的液相色谱测定

赵伟礼1吴周安2黄兰芳1郭方遒1

（1.中南大学，长沙 410083；2.巨化集团公司，浙江 衢州 324004）

用甲醇-乙腈和0.02 mol/L KH2PO4溶液为流动相进行梯度洗脱，在AKsail ODS色谱柱建立了分离检测2-羟基-6-萘甲酸及其杂质的分析方法。结果表明，2-羟基-6-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯、2-羟基-3-萘甲酸的RSD分别为0.000 4%、0.14%、0.23%、0.08%、0.11%，回收率为 86.70%～100.5%，定量限、线性关系、精密度和加标回收率均能满足定量分析要求。

2-羟基-6-萘甲酸；2-萘磺酸；1,4-萘二甲酸；2-羟基-6-萘甲酸甲酯；2-羟基-3-萘甲酸；高效液相色谱

2-羟基-6-萘甲酸是合成有机颜料、染料及医药等的重要中间体，能降低热致液晶聚合物的熔点，使其便于加工成型[1]。大多采用Koble-Schimitt反应来合成2-羟基-6-萘甲酸，但产品中含有许多的杂质，常见的有2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸和2-羟基-6-萘甲酸甲酯等[2]。

结合生产的实际需求，需建立一种快速、简便、准确的中间产品分析方法和产品质量检验方法。常用的化学分析无法准确测定各组分的含量，而气相色谱法大都需要采用衍生化技术，比较繁琐。采用高效液相色谱（HPLC），能得到较为满意的效果。目前，2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、2-羟基-6-萘甲酸采用HPLC法进行测定的报道较多，但对2-羟基-6-萘甲酸产品中含有的2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯杂质的HPLC法测定尚未见公开报道[3-6]。

1 实验内容

1.1 仪器与试剂

岛津LC-20AB HPLC仪，SPD-M20A PDA检测器，岛津LCsolution Ver 1.X工作站，PHSJ-4A型酸度计。

2-羟基-6-萘甲酸、2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯，均为标准品，质量分数为99.5%；氢氧化钠、甲醇，分析纯；乙腈、四氢呋喃，色谱纯。实验所用水为试验室二级用水（0.45 μm 滤膜抽滤）。

1.2 标准曲线的绘制

配制质量浓度分别为4 000 mg/L的2-羟基-6-萘甲酸、0.8 mg/L的2-萘磺酸、20 mg/L的1,4-萘二甲酸、40 mg/L的2-羟基-6-萘甲酸甲酯、20 mg/L的2-羟基-3-萘甲酸标准液，然后分别稀释成不同的质量浓度，通过手动进样，色谱工作站计算标准曲线。

1.3 试样处理

称取试样约0.4 g（精确到0.1 mg）到100 mL容量瓶中，用甲醇完全溶解后定容。

1.4 色谱条件

色谱柱为 AKsail ODS 250 mm×4.6 mm×5 μm；流动相：有机相为甲醇和乙腈以体积比4：1混合，水相为0.02 mol/L KH2PO4/H3PO4pH 3.9的缓冲溶液，采用梯度洗脱。体积流量1.0 mL/min，检测波长220 nm，柱温 40 ℃，进样量 4.0 μL。

1.5 测定

在以上操作条件下，采用外标法进行色谱分析，分析结果由岛津液相色谱工作站进行自动处理。

2 结果与讨论

2.1 溶剂的选择

称取一定量的标准对照品分别用水、0.1 mol/L氢氧化钠溶液、甲醇、乙腈和四氢呋喃溶剂进行试验，结果发现5种物质均不溶于水，均溶于甲醇。其中1,4-萘二甲酸不溶于乙腈和四氢呋喃，2-羟基-6-萘甲酸甲酯不溶于0.1 mol/L氢氧化钠溶液。选择甲醇为溶剂，分别用分析纯试剂和色谱纯试剂进行试验，结果没有差异，因此选择分析纯甲醇为溶剂。

2.2 色谱条件的选择

2.2.1 检测波长

定量称取一定量的标准对照品，以甲醇为溶剂，完全溶解后分别进行PDA检测器，检测结果见表1。

表1 吸收波长扫描结果Tab 1 Absorption wavelength scan results

由表1可知，在220 nm处尽管不是最大吸收，但杂质组分2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸有相对较强的吸收。因此选择检测波长为220 nm。

2.2.2 流动相

文献[7]所选择流动相为甲醇与四甲基溴化铵，该条件下2-羟基-3-萘甲酸和2-羟基-6-萘甲酸甲酯不能分离。而2-羟基-6-萘甲酸甲酯是一种中性的有机化合物，采用的离子对试剂不利于2-羟基-6-萘甲酸甲酯和2-羟基-3-萘甲酸的分离，宜采用分配色谱。根据待测组分是弱有机酸及其甲酯，以甲醇-水体系作为流动相，调节酸度以抑制酸的电离。

有机酸在溶液中的存在形式受流动相pH影响很大，根据部分物质的pKa和色谱柱的耐受性，选择磷酸缓冲溶液作为流动相水相进行试验，分别在pH＜1和pH＞4条件下考察，结果发现pH＜1时，1,4-萘二甲酸与2-羟基-3-萘甲酸无法完全分离，因而选择0.02 mol/L KH2PO4溶液、pH=3.9为水相缓冲盐条件。

在选定的缓冲盐条件下，等度洗脱时2-羟基-6萘甲酸甲酯出峰时间过长，因此选择梯度洗脱，使5个组分达到了满意的分离效率，但主峰2-羟基-6-萘甲酸的不对称度为4.5，色谱图显示出较强的前延峰，加入一定量的乙腈改善峰形，如图1。

2.3 线性范围、精密度及加标回收试验

2.3.1 线性范围

配制各组分不同含量的溶液进样以峰面积S对质量浓度ρ做线性回归试验，结果见图2。

图1 2-羟基-6-萘甲酸及其杂质的图谱Fig 1 2-hydroxyl-6-naphthalene acid and its impurities chromatogram

图2 各组分的线性回归Fig 2 The linear regression of various components

各物质回归方程：2-羟基-6-萘甲酸，S/（A·s）=6.213ρ/（mg·L-1），R2=999 6；2-羟基-3-萘甲酸，S/（A·s）=672.0ρ/（mg·L-1），R2=0.999 8；2- 萘 磺 酸 ，S/（A·s）=6 108ρ/（mg·L-1），R2=0.999 5；1,4-萘二甲酸，S/（A·s）=1 010ρ/（mg·L-1），R2=0.999 7；2-羟基-6-萘甲酸甲酯，S/（A·s）=449.7ρ/（mg·L-1），R2=1.000。 图 2 结果显示，5种组分均在各自的范围内满足定量分析要求。

2.3.2 精密度

某批次的试样5次分析结果见表2。

表2 2-羟基-6-萘甲酸及其杂质的定量分析结果Tab 2 The results of quantitative analysis from 2-hydroxyl-6-naphthalene acid and its impurities

对每一组分的测定结果进行Dixon检验，发现每组数据的最小值统计量r和最大值统计量r均小于α=0.05时的临界值Q，即数据均无异常值，分析结果符合精密度要求。

2.3.3 加标回收

产品以2-羟基-6-萘甲酸质量分数98.56%的样品作为试样做加标回收，对产品进行加标回收实验，结果见表3。

表3 2-羟基-6-萘甲酸及其杂质的加标回收Tab 3 Marked recoveries results of 2-hydroxyl-6-naphthalene acid and its impurities

2.3.4 检测限

定性限以3倍信噪比计算，定量限以10倍信噪比计算，结果见表4。

表4结果显示该方法能满足定性、定量要求。

表4 定性限和定量限计算结果Tab 4 Qualitative and loq results

3 结论

以甲醇为溶剂，用ODS C18柱分离，以甲醇-乙腈 （体积比 4：1）和0.02 mol/L的KH2PO4溶液（pH=3.9）为流动相进行梯度洗脱，能使被测的5个组分（2-羟基-6-萘甲酸、2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯）完全分离，RSD分别为0.000 4%、0.14%、0.23%、0.08%、0.11%，加标回收率为86.70%～100.5%，定量限、线性关系、精密度和加标回收率均能满足定量分析要求。

[1]精细化工原料及中间体[J].技术贸易,2006,8（7）：46.

[2]潘智存,李江屏,杜奕,等.6-羟基-2-萘甲酸的合成研究：全国高分子材料科学与工程应用研讨会论文集[C].绵阳,2000.

[3]景丽洁,李健秀,韩巨岩.反相高效液相色谱法测定2,3-酸[J].染料工业,2001,38（4）：31-32.

[4]王建刚,李健秀,孙红.高效液相色谱法测定2-羟基-3-萘甲酸生产废水中相关物质的含量[J].理化检测：化学分册,2005,41（2）：107-108.

[5]李春梅.2-萘酚反相高效液相色谱分析[J].染料与染色,2003,40（3）：172-174.

[6]施介华,周亮,王莲珍.1,1′-联-2-萘酚和2-萘酚反相高效液相色谱法测定[J].浙江工业大学学报,2006,34（3）：286-289.

[7]GB/T 2367—2009 2-羟基-6-萘甲酸的测定[S].

Determine C11H8O3and Its Impurity by HPLC

Zhao Weili1,Wu Zhouan2,Huang Lanfang1,Guo Fangqiu1
（1.Zhong Nan University,Changsha 410083;2.Juhua Group Technology Center,Quzhou,Zhejiang 324004）

A HPLC analytic method is established on the AKasail chromatography column for 2-hydroxyl-6-naphthalene acid and its impurities with mobile phase of methanol-acetonitrile and 0.02 mol/L KH2PO4solution for gradient elution.The results showed that the RSD is 0.0004%,0.14%,0.23%,0.08%,0.11%respectively for 2-hydroxyl-6-naphthalene acid,2-naphthalene sulfonic acid,1,4-Naphthalic acid,methyl 6-hydroxyl-2-naphthoate,2-hydroxyl-3-naphthalene,Recovery is 86.70% ～100.5%，Loq,linear relationship,precision and the recovery rate all meet the requirements of the quantitative analysis.

6-Hydroxy-2-naphthalene carboxylic acid;2-Hydroxy-6-naphthoic acid （C11H8O3）;2-naphthalenesulfonic acid;1,4-naphthalic acid;2-hydroxide radical-6-naphthalene dicaboxylate;2-hydroxide radical-3-naphthoic acid;HPLC

O657.7+2

A DOI10.3969/j.issn.1006-6829.2010.06.011

2010-10-09