付小猛 赵述淼 梁运祥 葛向阳

因抗生素的滥用而导致的毒性残留、耐药性等问题已引起人们的广泛关注。寻找安全、无毒的替代品迫在眉睫。作为抗生素的替代品之一，芽孢杆菌制剂能抑制肠道腐败菌的生长，促进动物生产，并且能形成芽孢，可以耐受高温和具有良好的贮存性能，一直都是畜牧业科研和生产人员关注的焦点[1]。

芽孢的形成受环境因素的影响，不同菌种形成芽孢的条件不同。枯草芽孢杆菌的芽孢较其它营养体细胞易保存，存活率高，是制备枯草芽孢杆菌制剂的理想存在形式，而制剂中的芽孢含量是影响产品应用效果的关键因素[2]。目前,芽孢杆菌制剂的生产方式有两种：液态发酵和固态发酵。液态发酵易实现纯培养和工业化生产，但对设备要求高，生产工艺复杂，且环境污染严重；而固体发酵采用的原料一般是廉价的农副产品(如麸皮、谷壳等)，采用的设备也较液体发酵简单，生产成本大大低于液体发酵。因此，选取合适的生产方式，实现低成本、高产率，满足畜牧业生产发展的需要，是一个亟待解决的课题[3]。本课题的研究目的就是通过对枯草芽孢杆菌固态发酵工艺的优化，以期获得较佳产孢条件，为饲用枯草芽孢杆菌制剂的产业化生产提供基础。

1 材料与方法

1.1 菌种

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CCAM 080032，本实验室保藏。

1.2 培养基

液体种子培养基：LB液体培养基；平板计数培养基：LB固体培养基；固体发酵培养基原料及试剂：麸皮、稻草粉、葡萄糖、胰蛋白胨、NH4NO3、KH2PO4等。……