徐明明，蔡雪辉，刘永刚，王淑杰，王洪峰，石文达，李丽琴，荣福龙

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001；2.东北农业大学，黑龙江哈尔滨150030)

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)属于套式病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属，可以引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)。该病于1996年在我国首次被发现[1]，临床表现为母猪晚期流产、早产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍和各年龄猪群呼吸道等症状。PRRSV基因组为不分节段的单股正链RNA，全长约15 kb，包括9个开放阅读框架(ORF)。根据血清型和遗传特性的差异，可将PRRSV划分为2个基因型，即欧洲型和美洲型，目前国内流行的主要基因型为美洲型。自2006年以来，高热病的爆发给我国养猪业带来巨大的经济损失，经研究证实引起该病的主要病原为高致病性PRRSV变异株(HP-PRRSV)[2]。

PRRSV GP3是由ORF3基因编码的一种高度糖基化蛋白，在病毒的致病性、复制、装配、变异和保护性反应等方面可能具有重要意义。GP3在病毒粒子中含量较少，其功能尚不清楚[3]。应用单克隆抗体(MAb)技术发现GP3中包含中和表位，可以诱导机体产生中和抗体[4]。杆状病毒表达系统可以对产物进行糖基化、磷酸化、酰基化和信号肽切除等修饰，使表达蛋白质正确折叠。因此，表达的外源蛋白在结构和生物学活性等方面更接近于天然蛋白[5]。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达HPPRRSV HuN4株的GP3，为进一步研究GP3的结构、功能以及免疫学特性奠定基础。

1 材料和方法

1.1 病毒株、菌株、细胞及血清 HP-PRRSV HuN4株、大肠杆菌JM109、昆虫细胞Sf9均由本实验室保存；……