万晓朋，曾显营，田国彬，李雁冰，邓国华，施建忠，刘丽玲，钟功勋，姜永萍，王彦妮，陈化兰

(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江哈尔滨150001)

H9N2亚型禽流感(Avian influenza，AI)是持续危害我国及世界养禽业发展的重要禽类传染病之一[1-2]，同时 H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)还可感染人，提供内部序列与H5N1亚型禽流感病毒重组[2-4]；并且具有人流感病毒的受体结合位点[3]，因此对H9N2亚型AI的研究具有重要的经济和公共卫生意义。

我国自1994年首次报道从鸡群分离到H9N2亚型AIV以来[5]，该亚型病毒已在我国广泛分布和流行[2]，并且在家禽中不断地进化[6-7]。疫苗免疫是控制H9N2亚型AI的重要措施之一，我国有多种不同厂家研制和生产H9N2亚型AI灭活疫苗，在我国大范围应用。然而，由于种种因素，目前H9N2亚型AIV仍然在我国持续流行。为筛选出具有良好免疫效果的疫苗株，本研究选取2008年分离自8个省份的15株H9N2亚型AIV进行分析，选择代表毒株进行鉴定并制备灭活疫苗，免疫SPF鸡进行免疫效力研究，期待筛选出适合我国大部分地区应用的H9N2亚型AI灭活疫苗理想种毒株。

1 材料和方法

1.1 病毒株和血清 18株H9N2亚型AIV由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的国家禽流感参考实验室分离、鉴定和保存，其中15株2008年分离病毒来源于湖南、广西、福建、山东、浙江、安徽、湖北、四川8个省份(表1)。病毒抗血清由国家禽流感参考实验室制备、保存。

表1 H9N2亚型禽流感病毒分离株及简称Table 1 H9N2 subtype AIV isolates and abbreviation

1.2 SPF鸡胚和SPF鸡 9日龄～11日龄SPF鸡胚和4周龄～8周龄SPF鸡均购自哈尔滨兽医研究所实验动物中心，感染实验在负压隔离器中进行。……