唐 利

（上海海利生物药品有限公司，上海 201403）

近年来，猪场发病越来越复杂，主要以混合感染和继发感染的为主，很难看到疾病的典型特征，仅仅根据临床症状已经很难来进行疾病诊断。在这种疾病流行趋势下，血清学检测方法尤其是ELISA抗体检测方法，因其操作简便、快速准确成为确诊疾病和建立疾病预警系统的有效手段。本人长期从事实验室检测分析和临床猪场疫病防控等工作，就蓝耳病ELISA抗体检测与该病防控应用做些总结，以供参考。

1 检测的目的

1.1 疾病预警和感染压力评估

通过检测猪蓝耳病病毒（PRRSV）抗体水平，可以了解猪蓝耳病（PRRS）在猪群中的流行及感染情况。目前使用比较广泛的是IDEXX蓝耳病ELISA抗体检测试剂盒，用其检测不同阶段仔猪或群体的抗体水平（包括ELISA数值高低和抗体均匀度），可以较好的了解蓝耳病在各个群体中的感染时间和感染压力。如图1所示。

该猪场仔猪未接种任何蓝耳病疫苗（包括“自家苗”），从检测结果可以看出：仔猪抗体阳性率在4～8周之间不明确（没有详细检测4～8周抗体），但是8周龄以后一直维持高的阳性率，显示存在蓝耳病病毒感染，同时，PRRS抗体数值也呈现上升趋势，抗体阳性率和抗体S/P值变化同步，提示存在蓝耳病病毒血症或急性感染。14周龄和24周龄一直处于高强度感染。

在评估猪群某个疾病感染压力的时候，群体抗体的均匀度更加重要。一般均匀度越好，整个群体的稳定性相对要好；反之，均匀度越差，离散度越高，群体稳定性越差。但是，均匀度好，抗体S/P值也很高，到也不是好现象。因此，综合评估依然要结合抗体水平的高低、抗体均匀度、猪群临床症状以及相应的病原学检测。

图1 PRRS抗体检测结果分析（仔猪－IDEXXPRRSAb）

很多猪场如果想很快了解仔猪PRRSV感染状况，可以直接检测仔猪特定阶段的PRRSV抗体水平，一般采集80日龄左右阶段比较常见，如图2。

场仔猪没有接种任何蓝耳病疫苗，在80日龄蓝耳病抗体（IDEXX蓝耳病抗体检测试剂盒）参差不齐，显示该阶段仔猪处于不稳定状态；PRRSV抗体阳性率很高，达到89.30%（见图3），显示该阶段仔猪已经有大部分存在PRRSV野毒感染。S/P值超过2.5占1/3左右，有的血清抗体S/P值超过3.0甚至更高，显示仔猪在80日龄之前已经受到蓝耳病野毒感染，且感染率比较高（S/P值≥0.4为阳性）。

1.2 免疫程序安排与免疫效果评估

疫苗免疫接种应该考虑蓝耳病在猪场内的感染规律，如有针对性地检测各个阶段仔猪蓝耳病抗体水平，从而进行有针对性的免疫预防，会取得比较好的接种效果。

通过抗体检测了解母源抗体的消长规律，能够初步确定免疫时机。一般很多疫苗接种仔猪的首免时间跟很多因素有关系，最主要的是仔猪母源抗体水平。如，仔猪猪瘟的首免时间要考虑母源抗体干扰，仔猪伪狂犬疫苗的首免也是。

如图4：该场仔猪未接种任何蓝耳病疫苗，在60～80日龄表现出死亡率升高，僵猪比例增加。蓝耳病抗体检测结果显示：仔猪在50日龄以后蓝耳病抗体阳性率和抗体水平上升，基于该场没有做过蓝耳病疫苗（包括“自家苗”），提示仔猪群在保育前期开始感染PRRSV，之后阳性率一直升高。根据商品猪PRRSV感染规律，建议该猪场蓝耳病活疫苗接种放在10～14日龄。该猪场虽然商品猪PRRSV感染率不断增高，甚至达到100%，但不一定所有猪只均发病或表现出PRRSV感染后的临床症状，这也是PRRSV感染的一个特点，即感染PRRSV，猪只不一定发病或表现出明显的临床症状。这在临床控制蓝耳病上就有个误区，即猪群不表现出蓝耳病症状，就认为没有蓝耳病。也有人提出这样一个观点：既然猪只感染PRRSV但是不发病，那是好事，无需接种疫苗。对于这个观点，本人持保留意见。猪只感染PRRSV不发病，但会引起免疫抑制、影响猪只生长以及会引起其它一些类问题，如继发感染等。防疫就是“预防为主”，等到发病（表现出症状）再想到防疫，损失要大得多。

图2 蓝耳病抗体检测结果－80日龄（IDEXXPRRSAb）

但这里要提醒的是，母源抗体对接种疫苗有干扰，检测的抗体水平不一定是母源抗体的全部，很可能仅是母源抗体的一部分指标，当然也不能认为就是中和抗体或保护性抗体，这和试剂盒检测的目标蛋白的抗体有关系。所以，不能混为一谈。如目前使用的IDEXX蓝耳病抗体检测试剂盒检测的抗体是PRRSVN蛋白抗体，N蛋白抗体不具有中和活性。因此，用该试剂盒检测的抗体水平与保护力之间没有相关性，不能用于评估疫苗免疫后的保护力。至于评估疫苗接种的效果，通过试验室检测方法可以从侧面来评估。体液免疫在抗击蓝耳病感染过程中到底有多大作用，仍不确定。因此，仅仅通过抗体检测来评估疫苗免疫效果有很大局限。即检测到的抗体高，不一定免疫效果就好；检测到的抗体很低，不一定免疫效果就差。这在蓝耳病免疫防疫中更加突出。笔者通过大量的临床检测显示，该试剂盒PRRSVELISA抗体检测S/P值过高，反而提示可能存在蓝耳病野毒感染。而S/P值的高低和病毒的毒力和感染强度似乎有一定关系。不过，该试剂盒检测PRRSV抗体水平用于评估猪群稳定及PRRSV感染状况有很大优势。

值得分享的是，蓝耳病活疫苗（CH-1R株）免疫后的用该试剂盒检测的抗体S/P值相对较低。经长期免疫的母猪，其蓝耳病抗体检测的S/P值能够维持在较低水平，抗体水平均匀度好；仔猪免疫后用该试剂盒检测的PRRSV抗体S/P值很低甚至小于0.4（S/P值＜0.4为阴性），这能与野毒感染状态进行区分，也说明该疫苗毒株的毒力更弱。

当然，影响疫苗免疫效果的因素很多，包括疫苗的质量，保存和运输，免疫途径和使用方式，免疫时机以及有无免疫抑制因素存在和猪群的健康状况等。

1.3 疾病诊断

图3 蓝耳病抗体检测结果－80日龄（阳性率）

图4 猪场蓝耳病抗体检测

根据临床情况，对疑似病例加以确诊，为现场诊断提供良好的依据。IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒检测的抗体S/P值的高低可能提示一些信息：当S/P≥2.5时则表示猪群可能处于病毒血症期；当S/P≥3.5时表示猪群处于急性感染；6-7周龄时，多数仔猪抗体可变为阴性（无病毒循环），之后如果PRRSV抗体依然存在，提示有PRRSV野毒感染。所以，临床上应用该试剂盒检测分析能够很轻松地评估猪群/场PRRSV感染压力，以制定科学合理的预防措施。当然，要确诊仍需要做病原学检测。当蓝耳病暴发时，诊断工作相当重要。虽然有时候诊断费用很高，但是误诊或者片面诊断的代价将比正确诊断所需的花费要多得多，这个和猪群稳定时不做预防，而当蓝耳病暴发时才采取预防措施的后果相似。一旦确诊，首要考虑PRRSV是如何在畜群中流行的。

2 蓝耳病防控

2.1 蓝耳病感染

美国通过对118个猪场进行研究其中56%(66/118)是由感染猪只的引进而感染；20%（23/118）是由污染的精液而感染；21%（25/118）是由污染物/泥浆，以及人员的流动而感染；还有3%（4/118）怀疑是由空气和节肢动物传播的。

妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。猪与猪之间相互传播是PRRSV传染发生的最主要的途径，与污染有PRRSV的运输工具、器械接触均可受到感染。感染猪的流动也是本病的重要传播方式。猪感染病毒后2～14周均可通过接触将病毒传播给其他易感猪。

持续性感染是PRRS流行病学的重要特征，PRRSV可在感染猪体内存在很长时间，造成PRRSV在猪群中生存、循环及再传播。这也是蓝耳病控制中的一个难点。在PRRSV感染致病过程中也可能涉及抗体依赖性增强作用（ADE）这一特性，即亚中和水平抗体会增强PRRSV致病性，这也是为什么仔猪断奶不久感染PRRSV后发病且死亡高的一个原因。

同时，引进带病毒血症的后备种猪与本场猪群间的水平和垂直传播导致本场发病，以及引进PRRSV阴性猪与本场PRRSV强阳性猪群之间传播导致新引进猪发病成为目前引种工作的一个难点。

空气传播在PRRSV传播途径中的作用还存有不同意见。传播媒介的传播可能与其机械性携带PRRSV有关系，如苍蝇体表携带PRRSV进行传播，但这不是PRRSV传播的主要途径。

2.2 免疫防疫

根据PRRSV的传播特点以及感染特点，即仔猪一般在断奶后至保育前期是PRRSV感染高峰期，及早接种疫苗是控制该病的重要有效措施。因此，笔者建议阳性猪场仔猪免疫一般“宜早不宜迟”。接种活疫苗能显著降低蓝耳病野毒感染率和发病严重程度，降低蓝耳病暴发时引起的损失。这些损失还没有包括生猪价格市场行情的变化和饲料价格的增长带来的影响。蓝耳病暴发后继发其他疾病会导致更加大的损失，还有诊断及检测上的发费。在开始采取预防措施之前，弄清楚病毒在畜群中的传播途径相当重要，尤其是在生长育肥猪中采取措施时更是如此。如果母猪群是稳定的，仔猪阶段通过采取小保育，疫苗接种和分阶段饲养等措施可以取得很好的预防效果。

当然，控制蓝耳病依然要采取综合措施，包括饲养管理、生物安全、免疫接种等措施，同时还要做好其他疫病免疫防疫工作，如猪瘟、伪狂犬、喘气病、细小、猪圆环病毒2型等。