戚志华，王庆伟，王四旺，张俊，刘新友，刘琳娜，张琰#（.第四军医大学唐都医院药剂科，西安市 7008；.第四军医大学药物研究所，西安市 700；.第四军医大学化学教研室，西安市 700）

药理学研究表明，红景天苷具有抗衰老、抗寒冷、抗微波辐射等作用[1～3]。红景天苷是“高原人参”红景天的主要活性成分之一，但红景天植物大多生长在高寒山区，天然资源逐渐匮乏，有的已经灭绝，这成为红景天苷进一步开发利用的瓶颈。女贞子是木犀科植物女贞Ligustrum lucidumAit.的干燥成熟果实，在我国药材资源丰富、价格低廉，其中的红景天苷含量可观[4]，可望成为红景天苷的另一个有效的天然来源。本试验测定西安市区不同生长期女贞子中红景天苷的含量，为更有效地开发利用女贞子中的红景天苷提供依据。

1 材料

1.1 仪器

LC-10型高效液相色谱（HPLC）仪、SPD-10型紫外检测器、CLASS-VP型工作站（日本岛津公司）；CP225D型分析天平（德国赛多利斯公司）；250LH型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。

1.2 试药

红景天苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110818-200404）；女贞子药材为每月同一天采自西安市区第四军医大学校园内，经陕西省药品检验所鉴定该药材系木犀科植物女贞L.lucidumAit.的果实；乙腈（色谱纯，美国Fisher公司）；超纯水（美国Millipore纯水系统）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Inertsil ODS-3 C18（250 mm×4.6 mm，5µm）；流动相：乙腈-水（13∶87）；流速 1 mL·min-1；检测波长：222 nm；柱温：室温；进样量：20 µL。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取红景天苷对照品5.95 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.238 mg红景天苷的溶液，摇匀，即得对照品贮备液，低温避光贮藏，备用。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取过80目筛的女贞子干燥粉末0.25 g，加水50 mL，称重，超声处理30 min，取出，放冷，再称重，用水补足失重，摇匀，经0.45µm微孔滤膜过滤，即得。

2.4 线性关系考察

精密吸取“2.2”项下对照品贮备液 0.5、1、2.5、5、8.5 mL，分别置于10 mL容量瓶中，甲醇定容，摇匀，与对照品贮备液构成6个不同浓度的对照品溶液。分别精密吸取20µL，按上述色谱条件进样分析。以进样浓度（C）为横坐标，峰面积积分值（A）为纵坐标，制备标准曲线，得回归方程为A＝32946.50C+23308.35（r＝0.9999，n＝6）。结果表明，红景天苷检测浓度在11.9～238µg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取同一对照品溶液20µL，按上述色谱条件重复进样5次。结果，红景天苷峰面积的RSD＝2.33%，表明仪器精密度较好。

2.6 稳定性试验

取同一样品，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别于0、1、2、4、8 h 精密吸取20 µL进样。结果，红景天苷峰面积的RSD＝1.25%，表明供试品溶液在8 h内稳定性较好。

2.7 重复性试验

精密称取同一批样品5份，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定。结果，红景天苷含量的RSD＝1.87%，表明方法重复性较好。

2.8 加样回收率试验

取已知含量的样品6份，分别精密加入一定量红景天苷对照品，照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（n＝6）Tab 1 Results of recovery test（n＝6）

2.9 样品含量测定

取不同生长期的女贞子样品各0.25 g，分别按“2.3”项下方法制成供试品溶液，按上述色谱条件测定峰面积并用外标法计算样品中红景天苷的含量。色谱见图1；样品含量测定结果见表2。

3 讨论

红景天苷的水溶性高于它的脂溶性，故样品以水超声处理。试验最终选择乙腈-水（13∶87）为流动相，所得图谱基线平稳，红景天苷达到了较好的分离。

图1 高效液相色谱图A.对照品；B.供试品1.红景天苷Fig1 HPLC chromatogramsA.substance control；B.test sample；1.salidroside

表2 样品含量测定结果（n＝3）Tab 2 Content determination of samples（n＝3）

女贞子在我国属资源丰富的林副产品，华东、华南、西南、华中等地区均有分布，既有野生也有人工栽培，在山区、平原甚至庭园都有栽种。女贞子每年成熟一次，资源丰富，可保证长期大规模开发利用。

女贞子中的化学成分在整个果实生长过程中变化复杂。文献[5，6]对女贞子中红景天苷的提纯工艺及含量测定作了报道，但未见对红景天苷在女贞子生长期中含量动态变化的研究报道。

由表2可见，8月份女贞子幼果中红景天苷的含量高达1.02%，而文献[7]报道人工栽培的大花红景天中红景天苷的含量最高为1.109%。可见，来源广泛、价格低廉的女贞子可作为红景天苷的有效天然来源。但是，女贞子中红景天苷的含量随生长期逐渐降低，12月份采集的女贞子中红景天苷的含量仅为0.3%。因此，提取女贞子中的红景天苷，女贞子幼果为比较经济的原料。

[1]黄 婉，杨耀芳.女贞子及其有效成分的药理及临床研究进展[J].现代中西医结合杂志，2003，7（12）：772.

[2]李 阳，孙文基.女贞子的药理作用研究[J].陕西中医学院学报，2004，29（5）：58.

[3]张 奕，刘永刚.红景天苷抗肝纤维化的实验研究[J].中国药房，2006，17（11）：813.

[4]赵继霄，杨 瑾，董根玲，等.女贞子研究进展[J].中华医学写作杂志，2004，11（18）：1599.

[5]王 丹，石力夫，胡晋红.柱层析预处理RP-HPLC法测定女贞子中红景天苷的含量[J].药学服务与研究，2006，6（2）：118.

[6]张立海，宋友华，孙春华，等.反相高效液相色谱法测定女贞子中红景天苷的含量[J].中国药学杂志，2001，36（11）：760.

[7]马 潇，宋玉成，谢 楠，等.HPLC法测定大花红景天中红景天苷及没食子酸的含量[J].药物分析杂志，2005，25（1）：58.