张 华 胡成进

(1.泰山医学院免疫学教研室，山东 泰安 271016; 2.济南军区总医院实验诊断科，山东 济南 250031)

1975年Kohler和Milstein建立了杂交瘤技术，将小鼠骨髓瘤细胞与产生绵羊红细胞抗体的小鼠脾细胞融合,形成的杂交瘤细胞既能产生抗体又能进行分裂繁殖，且产生的抗体只能识别一种抗原决定簇，称为单克隆抗体,单克隆抗体经历了鼠源性、人源性和全人化抗体三个阶段。迄今为止世界上已研制出数以千计的单克隆抗体，并广泛应用于生物学、医学领域,在疾病的发病机制、诊断和治疗方面发挥重要作用。本文从单克隆抗体的制备技术和临床应用方面进行综述。

1 单克隆抗体制备技术

1.1 杂交瘤技术

该技术主要包括免疫动物、细胞融合和杂交瘤细胞的筛选三个环节。

1.1.1免疫动物 目前常用BALB/C小鼠，也可用SCID 小鼠(severe conbined immumdeficiemy mice)、转基因小鼠、转染色体小鼠，用特定的外来抗原一次或多次免疫动物,刺激B淋巴细胞增殖形成浆细胞，分泌针对该抗原的抗体。

1.1.2细胞融合 常用骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞融合，通常采用PEG法或PEG电融合法，该法稳定，安全简单；也有报道用小鼠的腘窝淋巴结细胞和骨髓瘤细胞融合，5周内成功产生抗病毒的小鼠单抗。

1.1.3杂交瘤细胞筛选 HAT选择培养基有3种关键成分：次黄嘌呤(hypoxanthine，H)、甲氨蝶呤(aminopterin，A)和胸腺嘧啶核苷(thymidine，T)，A 是二氢叶酸还原酶抑制剂，可阻断核酸合成的主要途径。B淋巴细胞可通过补救途径，由胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase,TK)和次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosy transferase,HGPRT)利用T 和H合成核酸，但不能在体外长期生存；……